非洲绿猴肾细胞；VERO-76培养

细胞名称  非洲绿猴肾细胞；VERO-76培养
形态特性 上皮样细胞

品牌 贴壁生长

特征特性 为VERO细胞的一个亚克隆

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 新生牛血清，10%  

传代方法 1：

8,4-5天一次  

传代情况

冻存条件 基础培养液+20%牛血清+10%DMSO

支原体检测 培养法（-）　

STR

同工酶

染色体

使用权限 A类
非洲绿猴肾细胞；VERO-76培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-FABP(brain)/FITC 荧光素标记脑型脂肪酸结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Contactin-6/mNB-3/FITC 荧光素标记NB-3神经粘附蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C17orf42 17号染色体开放阅读框42抗体 规格 0.2ml

PP-2B alpha 1 蛋白磷酸酯酶-2B 催化亚单位(抗原) 0.5mg

HDAC4 + 5 + 9 英文名称： 组蛋白去乙酰化酶4+5+9抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh RNF93/ZNF178 环指蛋白93抗体 规格 0.2ml

Anti-Contactin-6/mNB-3/FITC 荧光素标记NB-3神经粘附蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 粘附分子整合素α5抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-ADRB1 肾上腺素能受体β1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-CD18 (Ser756/Thr758/759) 磷酸化整合素β2抗体 规格 0.1ml

ECL化学发光染色液 套 A和B液各50ml

VILIP1 英文名称： 神经视锥蛋白样1抗体(神经钙蛋白) 0.2ml

DNAJC9 英文名称： DNAJC9蛋白抗体 0.2ml

Anti-ADRB1 肾上腺素能受体β1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Rabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.1ml

GPATCH4 英文名称： G蛋白修补结构域蛋白4抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh AQP7 水通道蛋白-7抗体 规格 0.1ml

Anti-IL-2/FITC 荧光素标记白介素2抗体(人) IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Mink IgG/Cy5 Cy5标记的兔抗水貂IgG 规格 0.1ml

Anti-PTPN4/MEG1/FITC 荧光素标记蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
ADAM8(Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA KIT 小鼠解整合素样金属蛋白酶8Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-CD31/FITC 荧光素标记血小板内皮细胞黏附分子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh dUTPase 脱氧尿嘧啶三磷酸核苷水解酶抗体 规格 0.1ml

ECV IgG 艾柯病毒 IgG(间接法二步法)

MAOA 英文名称： 单氧化酶A抗体 0.1ml

Ankyrin G 英文名称： 锚定蛋白G抗体 0.2ml

Anti-CD31/FITC 荧光素标记血小板内皮细胞黏附分子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。