家猫肾细胞；CATK1培养

细胞名称  家猫肾细胞；CATK1培养
形态特性 上皮样，多角形

品牌 贴壁生长

特征特性 该细胞来源于一雄性家猫的肾组织。2000年由中国科学院昆明细胞库建立。

培养条件 M-199：

with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS  

传代方法 1：

2传代；3-4天一次  

传代情况 P4

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 荧光法（-）

STR -

同工酶

染色体

使用权限 A类
家猫肾细胞；CATK1培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-CLCA4/FITC 荧光素标记钙激活氯离子通道4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-phospho-IRS1(Tyr1222)/FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CCL13/MCP-4 单核细胞趋化蛋白4抗体 规格 0.2ml

IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原 0.5mg

H5N1 Hemagglutinin 英文名称： A型流感病毒H5N1凝集素 1ml

Rhesus antibody Rh SOX22 核转录因子SOX22抗体 规格 0.2ml

Anti-phospho-IRS1(Tyr1222)/FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
LH(Mouse luteotropic hormone)ELISA Kit 小鼠促黄体激素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-CLEC2D/OCIL/FITC 荧光素标记CLEC2D蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Dishevelled 3/DVL3 DVL3蛋白抗体 规格 0.2ml

Streptavidin/HRP 辣根过氧化物酶标记链霉亲和素 0.1ml

LZIC 英文名称： LZIC蛋白抗体 0.2ml

青霉素G检测试剂盒 96孔/盒 动物组织/水产/蜂蜜/奶

Anti-CLEC2D/OCIL/FITC 荧光素标记CLEC2D蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗小鼠IgG 0.1ml

GLP 2 英文名称： 肠高血糖素相关肽抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ankyrin erythroid 红细胞蛋白Ank1抗体 规格 0.2ml

Anti-ILTV/FITC 荧光素标记抗鸡传染性喉气管炎病毒抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗人IgG 规格 0.1ml

Anti-RNF126/FITC 荧光素标记环指蛋白126抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-phospho-Src(pTyr529)/FITC 荧光素标记抗磷酸化Src原癌基因抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Mouse Anti-rat IgM 小鼠抗大鼠IgM (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格： 1mg

胶质细胞源性神经营养因子抗体 Anti-GDNF 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的驴抗兔IgG 0.1ml

Phospho-FAK (Tyr925) 英文名称： 磷酸化粘着斑激酶抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Smad2(Thr220) 磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体 规格 0.1ml

Mouse Anti-rat IgM 小鼠抗大鼠IgM (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格： 1mg
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。