详细介绍
人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1价格
形态特性 多角
品牌 贴壁生长
特征特性 利用脂质体转染法将野生型PS1基因转染稳定表达APP基因的CHO细胞,该细胞既表达PS-1,同时也分泌Aβ。
培养条件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;250ug/ml G418+2.5ug/ml puromycin
传代方法 1:
3传代;2~3天1次。
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原ᰀ
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC 荧光素标记磷酸化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Profilin 2/FITC 荧光素标记前纤维蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOL3 载脂蛋白L3抗体 规格 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗猪IgG 0.1ml
GST tag 英文名称: GST标签蛋白抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-MG IgG/Cy7 Cy7标记的兔抗长爪沙鼠IgG 规格 0.1ml
Anti-Profilin 2/FITC 荧光素标记前纤维蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Lp-PL-A2 ELISA Kit 大鼠脂蛋白磷脂酶A2Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Zyxin/ESP 2 斑联蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FSH receptor 促卵泡刺激素受体抗体 规格 0.1ml
IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子结合蛋白4 96T
NSE 英文名称: 神经元特异性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗体 0.1ml
phospho-APC6 (Thr580) 英文名称: 磷酸化细胞分裂周期蛋白16抗体 0.1ml
Anti-Zyxin/ESP 2 斑联蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠k链 0.1ml
FBX09 英文名称: F-box蛋白9抗体 0.2ml
细胞球蛋白抗体 Anti-Cygb 0.1ml
Anti-PALB2/FITC 荧光素标记癌易感基因相关蛋白2IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser40) 磷酸化酪氨酸羟化酶抗体 规格 0.1ml
BSA/FITC 荧光素标记血清白蛋白Multi-class antibodies规格: 0.3ml
Anti-HSP-105/FITC 荧光素标记热休克蛋白HSP105抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-phospho-PKC delta (Thr505)/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB2 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族2抗体 规格 0.2ml
Donkey Anti-Goat IgG/RBITC 罗丹明标记的驴抗羊IgG 0.1ml
GLDC 英文名称: 甘酸脱羧酶P蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgG 兔抗小鼠IgG 规格 1mg
Anti-phospho-PKC delta (Thr505)/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml