正常大鼠肾细胞；NRK-52E培养

细胞名称  正常大鼠肾细胞；NRK-52E培养
形态特性 上皮细胞

品牌 贴壁生长

特征特性

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清，5%  

传代方法 消化3-5分钟。1：

2。3天内可长满。  

传代情况 P(16+5)

冻存条件 *培养基+8%DMSO

支原体检测 阴性　

STR

同工酶

染色体

使用权限 A类
正常大鼠肾细胞；NRK-52E培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti- Alpha-MSH/POMC /FITC 荧光素标记α黑素细胞刺激素/阿黑皮素原抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 荧光素标记抑素抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh 14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon) 14-3-3蛋白抗体 规格 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

GRIK3 英文名称： 谷酸受体红藻酸离子3/谷酸受体7抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PSMD10/Proteasome 26S S10 蛋白酶调解因子10抗体 规格 0.2ml

Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 荧光素标记抑素抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Lumbrokinase 蚯蚓纤溶酶(蚓激酶抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-SLAMF9 CD2F-10抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAI-1 纤溶酶原激活物抑制因子抗体 规格 0.1ml

CST7 Kit Human 人 Cystatin F / CST7 ELISA配对抗体 ELISA

Thymidylate synthase 英文名称： 胸苷酸合成酶抗体 0.1ml

Cadherin 8 英文名称： 钙粘附蛋白8抗体 0.2ml

Anti-SLAMF9 CD2F-10抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Gold 胶体金标记的兔抗猪IgG 0.5ml

phospho-FANCD2(Ser1404) 英文名称： 磷酸化FANCD2抗体 0.1ml

鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体 Anti-C-CRP 0.2ml

Anti-phospho-P53 (Ser46) /FITC 荧光素标记磷酸化抑制基因P53抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-β catenin(Tyr142) 磷酸化β 连环素蛋白抗体 规格 0.1ml

Rabbit Anti-bov IgG/Biotin 生物素化兔抗IgGMulti-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-phospho-PKC delta (Tyr52)/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Donkey Anti-Goat IgG 驴抗羊IgG (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格： 1mg

鼠抗人乙型肝炎表面抗原抗体 Anti-HRCAg/HBV 0.1ml

Dog IgM/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgM抗体 0.1ml

FGFR1OP 英文名称： FGFR1癌基因伴侣蛋白抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-RSK2(Ser369) 磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体 规格 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG 驴抗羊IgG (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格： 1mg
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。