详细介绍
大鼠肝细胞;BRL价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 大鼠肝细胞;BRL价格
形态特性 上皮细胞样
品牌 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:
3。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-Phospho-MK6 (Ser202)/FITC 荧光素标记磷酸化原活化蛋白激酶MKK6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 荧光素标记CD40结合蛋白/CD40受体相关因子1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABHD3 肺α/β水解酶蛋白3抗体 规格 0.2ml
Rabbit Anti-Avidin/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗亲和素 0.1ml
GRB10 英文名称: 生长因子受体结合蛋白10抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗体(原癌基因c MEL) 规格 0.1ml
Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 荧光素标记CD40结合蛋白/CD40受体相关因子1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
M2-PK(Mouse Pyruvate Kinase) ELISA Kit 小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CD58/LFA-3/FITC 荧光素标记淋巴细胞功能相关抗原-3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPY19L1 短粗矮胖19蛋白样1抗体 规格 0.2ml
RV IgM 风疹胞病毒 IgM(捕获法二步法)
Midkine 英文名称: 中期因子/肝素结合生长因子抗体 0.1ml
Annexin A7 英文名称: 膜粘连蛋白7抗体 0.1ml
Anti-CD58/LFA-3/FITC 荧光素标记淋巴细胞功能相关抗原-3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP7 英文名称: GTP酶IMAP家族成员7抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh APE/Girdin 肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体 规格 0.1ml
Anti-IL-17(Interleukin-17)human/FITC 荧光素标记白介素-17抗体(人)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗人IgM 规格 0.1ml
Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC 荧光素标记磷酸化细胞周期检控Rad17蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-phospho-PKC delta (Tyr311)/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Donkey Anti-Guinea IgG 驴抗豚鼠IgGMulti-class antibodies规格: 1mg
抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗体 Anti-HBV/pre S1/S2 protein 0.1ml
Dog IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗犬IgM抗体 0.1ml
FRMD8 英文名称: FRMD8蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-RSK2 (Ser227) 磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体 规格 0.1ml
Donkey Anti-Guinea IgG 驴抗豚鼠IgGMulti-class antibodies规格: 1mg