详细介绍
产品名称:人骨髓单核细胞试剂盒
规格:6次/盒
}贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-MAGE-A4/FITC 荧光素标记黑色素瘤相关抗原4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-TERT/FITC 荧光素标记端粒酶逆转录酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS15 整合素样金属蛋白酶与凝血酶15型抗体 规格 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗鸡IgM 0.1ml
GPX4 英文名称: 谷胱甘肽过氧化酶4抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗IgM 规格 0.1ml
Anti-TERT/FITC 荧光素标记端粒酶逆转录酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相关糖蛋白a/b(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-CD31/PECAM-1 血小板内皮细胞黏附分子-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PAFAH1B3/PAFAHG 血小板衍化生长因子γ抗体 规格 0.2ml
AXL Kit Mouse 小鼠 Axl Kinase ELISA配对抗体 ELISA
TET2 英文名称: 甲基双加氧酶TET2抗体 0.2ml
C20ORF141 英文名称: 20号染色体开放阅读框141抗体 0.2ml
Anti-CD31/PECAM-1 血小板内皮细胞黏附分子-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP8 英文名称: GTP酶IMAP家族成员8抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Apelin receptor/AGTRL1 血管紧缩素样蛋白1抗体 规格 0.2ml
Anti-IL-17R/IL-17RA/CD217/FITC 荧光素标记白介素17受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗人IgM 规格 0.1ml
Anti-Rad17/FITC 荧光素标记细胞周期检控Rad17蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
MUC5B(Human mucin-5 subtype B) ELISA kit 人粘蛋白/粘液素5BMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-ACY 3/HCV-HCBP1 丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MIIP IGFBP2结合蛋白/迁移和侵润抑制蛋白抗体 规格 0.2ml
DNase- I (Human deoxyribonuclease I ) ELISA Kit 人脱氧核糖核酸酶Ⅰ 96T
RNF130 英文名称: 环指蛋白130抗体 0.2ml
人骨髓单核细胞试剂盒CGGBP1 英文名称: CGG结合蛋白1抗体 0.1ml
Anti-ACY 3/HCV-HCBP1 丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。