详细介绍
产品名称:人少突胶质前体细胞鉴定试剂盒
规格:6次/盒
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-IKK beta /FITC 荧光素标记核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 荧光素标记磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh APRIN/PDS5B 雄激素诱导增殖抑制蛋白抗体 规格 0.2ml
Rabbit anti-MG IgG/FITC FITC标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.3ml
GPSM2 英文名称: G蛋白信号调节蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG 规格 1mg
Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 荧光素标记磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相关蛋白1A抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受体3抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PEA3 瘤促活化因子3抗体 规格 0.2ml
CD34 1:200 浓缩液 0.1ml 进口分装
Trop-2 英文名称: 原肌球蛋白抗体 0.1ml
CKLF 英文名称: 趋化素样蛋白抗体 0.2ml
Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受体3抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM 1mg
Fibulin 5 英文名称: 衰老关键蛋白抗体 0.2ml
热休克蛋白-27抗体 Anti-HSP-27 0.1ml
Anti-PLGF/FITC 荧光素标记胎盘生长因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷酸化成视网膜细胞瘤抑癌蛋白抗体 规格 0.1ml
Anthrax 炭疽沉淀素血清(马来源)Multi-class antibodies规格: 1ml
ATEXPA10 peptide 植物扩张蛋白ATEXPA10(拟南芥)抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗体 Anti-phospho-Bcl-xL 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1166) 磷酸化表皮生长因子受体抗体 规格 0.1ml
人少突胶质前体细胞鉴定试剂盒DMEM高糖 10×1L Gibco
ZNF740 英文名称: 锌指蛋白740抗体 0.2ml
DYRK3 英文名称: 双特异性酪酸磷酸化调节激酶3抗体 0.2ml
抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗体 Anti-phospho-Bcl-xL 0.1ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。