详细介绍
细胞名称 杂交瘤细胞株;ZJEB8-01培养
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
杂交瘤细胞株;ZJEB8-01培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-Integrin Alpha6/CD49f/VLA-6/FITC 荧光素标记整合素α6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-phospho-SHC (Tyr349) /FITC 荧光素标记磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Amphiregulin 双调蛋白(结肠直肠细胞源性生长因子)抗体 规格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Bio 生物素标记的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
GOLGA7 英文名称: 高尔基体膜相关蛋白7抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/Gold 胶体金标记的兔抗马IgG 规格 0.5ml
Anti-phospho-SHC (Tyr349) /FITC 荧光素标记磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶AMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-AMACR/P504S /FITC 荧光素标记α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAT/CDHF7/FAT1 钙粘蛋白家族成员7抗体 规格 0.1ml
IL-2R(Mouse Interleukin-2 receptor) ELISA kit 小鼠白介素2受体 96T
phospho-MAP3K7IP1(Thr431) 英文名称: 磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体 0.1ml
AADACL2 英文名称: 芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白2抗体 0.2ml
Anti-AMACR/P504S /FITC 荧光素标记α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受体RXRα抗原 0.5mg
phospho-IRAK4 (Thr345) 英文名称: 磷酸化白介素-1受体相关激酶4抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh CDCA7 细胞分裂周期相关蛋白 规格 0.2ml
Anti-CD3/RBITC 红色荧光素罗丹明标记CD3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh TFCP2C 转录因子CP2抗体 规格 0.2ml
Anti-HIV gp41/FITC 荧光素标记艾滋病病毒抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
HSP-90Alpha(Heat Shock Protein 90Alpha ) 热休克蛋白90α(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-CD226/DNAM-1 CD226抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Pan-ras Pan ras抗体 规格 0.1ml
CST4 Kit Human 人 Cystatin S / CST4 ELISA配对抗体 ELISA
TNFRSF14 英文名称: 坏死因子受体超家族成员14抗体 0.2ml
CYP19 英文名称: 细胞色素P450 19抗体 0.1ml
Anti-CD226/DNAM-1 CD226抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml