详细介绍
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;3G10培养
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;3G10培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-Nanog/FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-V.cholera Ogawa/FITC 荧光素标记01群稻叶型霍乱弧菌抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
alpha-1肾上腺素能受体抗体 Anti-ADRA1 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG/Gold 胶体金标记的小鼠抗羊IgG 2ml
Glycophorin C 英文名称: 糖蛋白C抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Proteasome 20S beta 3 蛋白酶体PSMβ3抗体 规格 0.2ml
Anti-V.cholera Ogawa/FITC 荧光素标记01群稻叶型霍乱弧菌抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Beta-casein( Beta-casein)/FITC 荧光素标记 β-酪蛋白(抗体)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERCC6L 发育相关蛋白ERCC6L抗体(乙醇致畸因子) 规格 0.2ml
Human lymphocyte factor ELISA Kit 人淋巴细胞因子 96T
MYL7 英文名称: 肌球蛋白轻链7抗体 0.2ml
ARL8B 英文名称: ADP核糖基化样因子8B抗体 0.2ml
Anti-Beta-casein( Beta-casein)/FITC 荧光素标记 β-酪蛋白(抗体)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit 人鳞状细胞癌相关抗原 96T
NFIA 英文名称: 核因子1A抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC标记的羊抗豚鼠IgG 规格 0.3ml
(NF-κB)ELISA Kit 大鼠核因子κBMulti-class antibodies规格: 48T
BMP5 英文名称: 骨形态发生蛋白5抗体 0.1ml
Anti-SYVN1 滑膜细胞凋亡抑制物1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Big ET(Mouse Big Endothelin) ELISA Kit 小鼠大内皮素Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Anti-CD44v10 /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠CD44V10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DUSP13 双特异性磷酸酶13抗体 规格 0.2ml
COX IgG III 柯萨奇病毒 IgG Ⅲ(间接法二步法)
MUM1 英文名称: 突变的黑色素瘤相关抗原1抗体 0.2ml
ATP6V1G2 英文名称: 氢离子转运ATP合成酶6G抗体 0.1ml
Anti-Anti-CD44v10 /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠CD44V10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。