杂交瘤细胞；19A4培养

细胞名称  杂交瘤细胞；19A4培养
形态特性 淋巴母细胞样

品牌 半贴壁生长

特征特性 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

传代方法 1：

3传代，3-4天传1次  

传代情况 C5

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR

同工酶

染色体

使用权限 未定

杂交瘤细胞；19A4培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-MTA1/FITC 荧光素标记转移相关蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-T Beta10/FITC 荧光素标记胸腺素β10抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

8-羟基脱氧鸟苷 anti-8-OHdG 0.2ml

Mouse Anti-Rabbit IgM/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的小鼠抗兔IgM 0.1ml

GHDC 英文名称： GHDC蛋白抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PSAP/PAP 前列腺酸性磷酸酶抗体 规格 0.1ml

Anti-T Beta10/FITC 荧光素标记胸腺素β10抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
NKB ELISA Kit(Ret) 大鼠神经肽BMulti-class antibodies规格： 96T

Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 荧光素标记缓激肽B2受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ERK1/MAPK3 原活化蛋白激酶3抗体 规格 0.1ml

TARC/CCL17(Human thymus activation regulated chemokine) ELISA Kit 人胸腺活化调节趋化因子 96T

MX2 英文名称： 干扰素诱导GTP结合蛋白MX2抗体 0.2ml

Adenylate kinase 2 英文名称： 腺苷酸激酶2抗体 0.2ml

Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 荧光素标记缓激肽B2受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
sFASL(Human soluble Factor-related Apoptosis ligand) ELISA Kit 人可溶性凋亡相关因子配体 96T

Phospho-MSK1 (Ser360) 英文名称： 磷酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh ET-3 内皮素3抗体 规格 0.2ml

IGF-2 ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子2Multi-class antibodies规格： 48T

ATF1 英文名称： 活化转录因子1抗体 0.1ml

Anti-BAFF/CD257/FITC 荧光素标记TNF家族B细胞激活因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
mouse IgM ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgMMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-CX45/FITC 荧光素标记间隙连接蛋白45抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DcR3/TR6 诱捕受体3抗体 规格 0.1ml

Chicken IgG/APC 荧光素APC标记鸡IgG 0.1ml

Leptin receptor(long) 英文名称： 瘦素受体抗体(长) 0.1ml

沙丁胺醇多克隆抗体 兔多抗 0.1

Anti-CX45/FITC 荧光素标记间隙连接蛋白45抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml