详细介绍
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;IL-8培养
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 半贴壁生长
特征特性 细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
小鼠杂交瘤细胞;IL-8培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-Rb/RB1 protein/FITC 荧光素标记视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG Whole serum 兔抗羊IgG抗血清Multi-class antibodies规格: 1ml
胰岛素样生长因子-II抗体 Anti-IGF-II 0.1ml
Mouse Anti-Bov IgG 小鼠抗IgG 1mg
FXYD6 英文名称: FXYD离子转运调节因子6抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Pyk2/PTK2B(Tyr402) 磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗体 规格 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG Whole serum 兔抗羊IgG抗血清Multi-class antibodies规格: 1ml
Pentosidine ELISA Kit 大鼠戊糖素Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Acetylated-p53 (Lys382) 乙酰化P53(Lys382)抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GLT8D1 糖基转移酶8结构域1抗体 规格 0.2ml
histon-H2b ELISA Kit 大鼠组蛋白H2b 96T
Neuropeptide S 英文名称: 神经肽S抗体 0.2ml
phospho-Androgen Receptor (Ser578) 英文名称: 磷酸化雄激素受体抗体 0.1ml
Anti-Acetylated-p53 (Lys382) 乙酰化P53(Lys382)抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
SP-R(Human substance P receptor) ELISA Kit 人P物质受体 96T
Rho C 英文名称: RhoC抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGEA2 黑色素瘤相关抗原2抗体 规格 0.2ml
MCV(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 48T
CCL3 英文名称: 巨噬细胞炎性蛋白1α抗体 0.1ml
Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
AFA(Human anti-filaggrin antibody) ELISA Kit 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-IL1RAPL1 白介素1受体相关蛋白样1前体蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRRC59 LRRC59蛋白抗体 规格 0.2ml
CALD(Human Caldesmon) ELISA Kit 人钙调结合蛋白 96T
phospho-RPS6KB1(Ser434) 英文名称: 磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 0.1ml
CX3CR1 英文名称: 趋化因子受体1抗体 0.1ml
Anti-IL1RAPL1 白介素1受体相关蛋白样1前体蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml