详细介绍
人胆管癌耐药细胞株;RBE/5-FU价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人胆管癌耐药细胞株;RBE/5-FU价格
形态特性 上皮样
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-Phospho-PRAS40 (Thr246)/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
dog IgM (亲和纯化) 狗IgMMulti-class antibodies规格: 1mg
丙型肝炎病毒-NS4a抗体 Anti-HCV-NS4a 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG 驴抗豚鼠IgG 1mg
FAM153B 英文名称: FAM153B蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KA1(Thr348) 磷酸化磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体 规格 0.1ml
dog IgM (亲和纯化) 狗IgMMulti-class antibodies规格: 1mg
SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit 小鼠基质细胞衍生因子1βMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-CD13/FITC 荧光素标记氨肽酶N抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh E2F4 转录因子E2F-4抗体 规格 0.1ml
PIV IgG 付流感病毒 IgG(间接法二步法)
MSH γ1 英文名称: 促黑细胞激素γ1抗体 0.2ml
ALAS1 英文名称: 5-基乙酰丙酸合酶1抗体 0.2ml
Anti-CD13/FITC 荧光素标记氨肽酶N抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
TOXO IgM 弓形虫抗体 IgM(捕获法一步法)
MAX protein 英文名称: Myc基因相关X因子抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh DPYD 二氢嘧啶脱氢酶抗体 规格 0.2ml
TFR/CD71(Mouse transferrin receptor) ELISA Kit 小鼠转铁蛋白受体Multi-class antibodies规格: 48T
ABCA2 英文名称: 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2抗体 0.2ml
Anti-CD56/FITC 荧光素标记CD56抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit 人碱性磷酸酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-NGB 脑红蛋白/神红蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-20RB/IL-20R2 白介素20受体β链抗体 规格 0.2ml
ASA(Human Anti-Somatic Muscle Antibody) ELISA Kit 人抗骨骼肌抗体 96T
P70 Beta 2 英文名称: 核糖体S6蛋白激酶β2抗体 0.1ml
CA I 英文名称: 碳酸酐酶1抗体 0.2ml
Anti-NGB 脑红蛋白/神红蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml