详细介绍
慢性粒细胞白血病细胞;K-562价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 慢性粒细胞白血病细胞;K-562价格
形态特性 成淋巴细胞
品牌 悬浮生长
特征特性 该细胞适合做转染宿主,来自于一位53岁女性慢性粒细胞白血病人的胸腔积液
培养条件 IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 PN5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR AMEL:X,X;CSF1PO:9,10;D12S391:23,23;D13S317:8,8;D16S539:11,12;D18S51:
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-P-HP1/FITC 荧光素标记抗异染色质蛋白1磷酸化抗体(果蝇)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-HAS(human serum albumin) 兔抗人血清白蛋白 (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 0.2ml
葡萄糖转运蛋白4抗体 Anti-GLUT4 0.1ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/FITC FITC标记的兔抗IgM 0.3ml
FAM101A 英文名称: FAM101A蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-SHC (Tyr427) 磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体 规格 0.1ml
Anti-HAS(human serum albumin) 兔抗人血清白蛋白 (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 0.2ml
sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 )ELISA Kit 大鼠可溶性凋亡相关因子Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Gold 胶体金标记的羊抗人IgG 规格 0.5ml
Hpt/HP ELISA Kit 大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白 96T
CDCA1 英文名称: 细胞分裂周期相关蛋白1抗体 0.2ml
phospho-B-Raf (Ser446) 英文名称: 磷酸化B-Raf抗体 0.1ml
Anti-STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
TR ELISA Kit 大鼠凝血酶受体 96T
OPA1 英文名称: 视神经相关蛋白1抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh GPR30 G蛋白偶联受体30抗体 规格 0.1ml
Human parathyroid hormone-like protein,PLP ELISA Kit 人甲状旁腺激素样蛋白Multi-class antibodies规格: 48T
BCMA 英文名称: B淋巴细胞成熟因子抗体 0.1ml
Anti-Sema7A/CD108 轴突生长因子CD108抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-BRMS-1/FITC 荧光素标记癌转移抑制基因1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-GRM2+GRM4/FITC 荧光素标记促代谢型谷氨酸受体2+4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CHRNA7 烟碱型乙酰胆碱受体α7抗体 规格 0.1ml
AQP4(aquaporin Protein-4) 水通道蛋白-4(抗原) 0.5mg
ADM2 英文名称: 中介素抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh TNFSF15/TL1A 坏死因子配体超家族成员15抗体 规格 0.2ml
Anti-GRM2+GRM4/FITC 荧光素标记促代谢型谷氨酸受体2+4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml