详细介绍
细胞名称 人肾透明细胞癌细胞;LoMet-ccRCC培养
形态特性 上皮细胞样
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
人肾透明细胞癌细胞;LoMet-ccRCC培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-NK-2R/FITC 荧光素标记神经激肽A受体/K物质受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-WNK4/FITC 荧光素标记一种新的丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体 Anti-Bid 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/Gold 胶体金标记的羊抗鸡IgG 0.5ml
FABP12 英文名称: 脂肪酸结合蛋白12抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh PPIL1 亲环素相关蛋白1抗体 规格 0.2ml
Anti-WNK4/FITC 荧光素标记一种新的丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicaonate cotransporter NBC1) 碳酸氢钠协同转运蛋白4-A4Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-phospho-Bim(Ser69) 磷酸化细胞死亡调解子抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PGCP 血浆谷氨酸羧肽酶抗体 规格 0.2ml
F.VIII/ VWF 浓缩液 0.1ml 进口分装
TNFRSF13B 英文名称: 坏死因子受体超家族成员13B抗体 0.2ml
C1orf157 英文名称: 1号染色体开放阅读框57抗体 0.2ml
Anti-phospho-Bim(Ser69) 磷酸化细胞死亡调解子抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Tris- HCl-TWEEN 20缓冲液 100ml 0.5mol/L pH7.6
VEGF-B 英文名称: 血管内皮生长因子B抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Ser444) 磷酸化B-Raf抗体 规格 0.1ml
Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide 髓样细胞白血病-1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DUOX2 英文名称: 双氧化酶2/甲状腺氧化酶2抗体 0.2ml
Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser182) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
LAM(Human Lipoarabinomannan) ELISA Kit 人脂阿拉伯甘露聚糖Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-PDGF Receptor alpha/PDGF-R-A 血小板源性生长因子受体-A抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HMGA1/HMG-I/HMG-Y 高迁移率族蛋白A1抗体 规格 0.2ml
Apo A1(Human anti-apolipoprotein A1 antibody) ELISA Kit 人抗载脂蛋白抗体A1 96T
PDHX 英文名称: 酸脱氢酶复合物X蛋白抗体 0.2ml
C1orf2 英文名称: 1号染色体开放阅读框2抗体 0.2ml
Anti-PDGF Receptor alpha/PDGF-R-A 血小板源性生长因子受体-A抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
3传代,3-4天传1次
传代情况 C4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
人膀胱癌细胞;H/RB-CL2培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
人膀胱癌细胞;H/RB-CL2培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
人膀胱癌细胞;H/RB-CL2培养悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-Tbx21/T-bet/FITC 荧光素标记T细胞介导的转录调节因子Tbx21抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 丙酮酸激酶-M2(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
造血细胞磷酸酶抗体 Anti-SHP-1 0.2ml
phospho-STAT3 (Tyr705) 英文名称: 磷酸化信号转导和转录激活因子3抗体 0.1ml
EYA2 英文名称: 眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-M-CSF Receptor(Tyr708) 磷酸化巨噬细胞集落刺激因子受体抗体 规格 0.1ml
M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 丙酮酸激酶-M2(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
sm Actinin- Alpha(Mouse skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 小鼠横纹肌辅肌动蛋白αMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE PE标记的驴抗豚鼠IgG 规格 0.1ml
Mouse Beta-Defensins, Beta-DF ELISA Kit 小鼠β-防御素 96T
MrpL39 英文名称: 线粒体核糖体蛋白L39 0.1ml
AKAP5 英文名称: A激酶锚定蛋白5抗体 0.2ml
Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Trk B 神经生长因子受体的一种(抗原) 0.5mg
phospho-HMGCR(Ser872) 英文名称: 磷酸化三羟基*基辅酶A还原酶抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh C20orf160 20号染色体开放阅读框160抗体 规格 0.2ml
Anti-EP3/FITC 荧光素标记前列腺素E受体3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh S100A13 S100A13抗体 规格 0.1ml
Anti-HSD11B2/HSD2 /FITC 荧光素标记羟基类固醇脱氢酶11β2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
人膀胱癌细胞;H/RB-CL2培养OxLDL ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Adipo R1/FITC 荧光素标记脂联素受体-1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FEZ1 脑胚胎锌指样蛋白1抗体 规格 0.2ml
APC ELISA Kit 大鼠活化蛋白C 96T
Phospho-Met (c-Met) (Tyr1003) 英文名称: 磷酸化肝细胞生长因子受体(原癌基因)抗体 0.1ml
ARRDC2 英文名称: 抑制蛋白结构域蛋白2抗体 0.2ml
Anti-Adipo R1/FITC 荧光素标记脂联素受体-1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml