人膀胱癌细胞；H/RB-CL2培养

细胞名称  人膀胱癌细胞；H/RB-CL2培养
形态特性 上皮细胞样

品牌 贴壁生长

特征特性 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

传代方法 1：

3传代，3-4天传1次  

传代情况 C4

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR

同工酶

染色体

使用权限 未定
人膀胱癌细胞；H/RB-CL2培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-Tbx21/T-bet/FITC 荧光素标记T细胞介导的转录调节因子Tbx21抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 丙酮酸激酶-M2(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

造血细胞磷酸酶抗体 Anti-SHP-1 0.2ml

phospho-STAT3 (Tyr705) 英文名称： 磷酸化信号转导和转录激活因子3抗体 0.1ml

EYA2 英文名称： 眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-M-CSF Receptor(Tyr708) 磷酸化巨噬细胞集落刺激因子受体抗体 规格 0.1ml

M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 丙酮酸激酶-M2(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
sm Actinin- Alpha(Mouse skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 小鼠横纹肌辅肌动蛋白αMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE PE标记的驴抗豚鼠IgG 规格 0.1ml

Mouse Beta-Defensins, Beta-DF ELISA Kit 小鼠β-防御素 96T

MrpL39 英文名称： 线粒体核糖体蛋白L39 0.1ml

AKAP5 英文名称： A激酶锚定蛋白5抗体 0.2ml

Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Trk B 神经生长因子受体的一种(抗原) 0.5mg

phospho-HMGCR(Ser872) 英文名称： 磷酸化三羟基*基辅酶A还原酶抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh C20orf160 20号染色体开放阅读框160抗体 规格 0.2ml

Anti-EP3/FITC 荧光素标记前列腺素E受体3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh S100A13 S100A13抗体 规格 0.1ml

Anti-HSD11B2/HSD2 /FITC 荧光素标记羟基类固醇脱氢酶11β2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
OxLDL ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Adipo R1/FITC 荧光素标记脂联素受体-1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FEZ1 脑胚胎锌指样蛋白1抗体 规格 0.2ml

APC ELISA Kit 大鼠活化蛋白C 96T

Phospho-Met (c-Met) (Tyr1003) 英文名称： 磷酸化肝细胞生长因子受体(原癌基因)抗体 0.1ml

ARRDC2 英文名称： 抑制蛋白结构域蛋白2抗体 0.2ml

Anti-Adipo R1/FITC 荧光素标记脂联素受体-1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml