人前列腺癌细胞；2B4培养

细胞名称  人前列腺癌细胞；2B4培养
形态特性 上皮细胞样

品牌 贴壁生长

特征特性 该细胞是一株人前列腺癌细胞系，可用于人前列腺癌细的基础和临床研究。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

传代方法 1：

3传代,2-3天传一代  

传代情况 C6

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR

同工酶 同工酶鉴定

染色体

使用权限 A类
人前列腺癌细胞；2B4培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-Phospho-SRC-3 (Thr24)/FITC 荧光素标记磷酸化类固醇受体辅助活化因子-3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烃受体抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

配对盒基因3抗体 Anti-PAX3 1ml

SERPINB4 英文名称： 丝酸蛋白酶抑制剂B4抗体(鳞状细胞癌抗原) 0.1ml

Exonuclease 1 英文名称： 核酸外切酶1抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-NFATc2(Ser326) 磷酸化核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 规格 0.1ml

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烃受体抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
sMHC-2(Mouse soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重链Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC 荧光素标记兔抗人、小鼠磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ENPP7 碱性鞘磷脂酶7抗体 规格 0.1ml

IFN- Alpha/ BetaR(Human Interferon Alpha/ BetaReceptor) ELISA Kit 人α/β干扰素受体 96T

MAGEB1 英文名称： 黑色素瘤相关抗原B1抗体 0.2ml

Alpha B Crystallin 英文名称： α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体 0.1ml

Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC 荧光素标记兔抗人、小鼠磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Try- II (Human Trypsinogen-2) ELISA Kit 人胰蛋白酶原Ⅱ 96T

Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D 英文名称： ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh MK1/2(MAPKK1) 原活化蛋白激酶激酶1抗体 规格 0.1ml

PHC(Human primary hepatic carcinoma) ELISA Kit 人肝癌抗原Multi-class antibodies规格： 48T

C1orf194 英文名称： 1号染色体开放阅读框194抗体 0.2ml

Anti-HDAC9 组蛋白去乙酰化酶9抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
GCA(Human gastrin cell antibody) ELISA Kit 人胃泌素细胞抗体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-HSP27 热休克蛋白-27抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAS1L G蛋白偶联受体MAS相关蛋白抗体 规格 0.2ml

AP(Human Aprotinin) ELISA Kit 人抑肽酶 96T

RILPL2 英文名称： Rab溶酶体相互作用蛋白样2抗体 0.2ml

C2a 英文名称： 补体C2a链多肽抗体 0.1ml

Anti-HSP27 热休克蛋白-27抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml