人卵巢癌细胞；Anglne培养

细胞名称  人卵巢癌细胞；Anglne培养
形态特性 上皮细胞样

品牌 贴壁生长

特征特性 Anglne细胞由德国学者建系。该细胞系主要用于卵巢癌的病理学研究，抗肿瘤药物筛选。研究证明，Anglne细胞系为贴壁生长，较COC1细胞系培养方便。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

传代方法 1：

3传代,2-3天传一代  

传代情况 C74

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR STR鉴定

同工酶

染色体

使用权限 A类
人卵巢癌细胞；Anglne培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-Vimentin/FITC 荧光素标记波形蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CGB(Chromogranin B) 嗜铬粒素B抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

周期素依赖激酶1抗体 Anti-Cdc2/P34CDC2/CDK1 0.1ml

SUFU/Suppressor of Fused 英文名称： 抑制Hh信号通路蛋白SUFU抗体 0.2ml

ESAT6 英文名称： 结核分枝杆菌分泌性蛋白ESAT6抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GADD153 (Ser30) 磷酸化GADD153抗体 规格 0.1ml

CGB(Chromogranin B) 嗜铬粒素B抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信号识别颗粒抗体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-IGFBP3 胰岛素样生长因子结合蛋白3抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAL/MPV17 T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体 规格 0.2ml

1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羟基维生素D3 96T

RNF39 英文名称： 环指蛋白39抗体 0.2ml

CNPase 英文名称： C型钠尿肽抗体 0.1ml

Anti-IGFBP3 胰岛素样生长因子结合蛋白3抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人酪酸激酶2 96T

RNF35 英文名称： 环指蛋白35抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh MC3 Receptor 黑素皮质素受体3抗体 规格 0.2ml

SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白AMulti-class antibodies规格： 48T

phospho-Caseine Kinase 1 alpha (Thr1194) 英文名称： 磷酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα抗体 0.1ml

Anti-HPV16-E7 人类状瘤病毒16-E7抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
bFGF-6 ELISA Kit 大鼠碱性成纤维细胞生长因子6Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-APP/FITC 荧光素标记APP淀粉样肽前体蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM50A FAM50A蛋白抗体 规格 0.2ml

ANG-4 ELISA Kit 大鼠血管生成素4 96T

MYCBPAP 英文名称： MYCBPAP抗体 0.1ml

ATG9A 英文名称： 自噬相关蛋白9A抗体 0.2ml

Anti-APP/FITC 荧光素标记APP淀粉样肽前体蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml