详细介绍
细胞名称 人肝癌细胞;HepG2[HepG2]培养
形态特性 上皮细胞样
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白;表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体;该细胞具有3-羟基-3-甲酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C76
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-Tubulin- Alpha/FITC 荧光素标记微管蛋白α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Caspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
锌指蛋白300抗体 Anti-ZNF300 - middle 0.1ml
SLC9A9 英文名称: 钠氢通道蛋白9家族A9抗体 0.2ml
ERMAP 英文名称: 红细胞膜相关蛋白ERMAP抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IGF1R(Tyr980) 磷酸化胰岛素样生长因子1受体抗体 规格 0.1ml
Caspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
ssDNA(human single stranded DNA Antibody) ELISA Kit 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-Insulin Receptor Beta (Tyr1361) 磷酸化胰岛素受体β抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LIS1 无脑回的致病基因LIS1抗体 规格 0.2ml
TBA(Human Total bile acide) ELISA Kit 人总胆汁酸 96T
RASSF7 英文名称: RAS家族关联结构域蛋白7抗体 0.2ml
C12ORF49 英文名称: 12号染色体开放阅读框49抗体 0.2ml
Anti-Phospho-Insulin Receptor Beta (Tyr1361) 磷酸化胰岛素受体β抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
UCN(Urocortin)mouse ret 新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠) 0.5mg
IER5L 英文名称: 即刻早期应答基因5样蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Chemerin/TIG2 视黄酸受体应答蛋白2抗体 规格 0.1ml
Anti-Calpain 2/FITC 荧光素标记钙蛋白酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh TMPRSS4 膜型丝氨酸蛋白酶2抗体 规格 0.2ml
Anti-GZMA/FITC 荧光素标记颗粒酶A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]培养IL-1 Beta(Human Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 人白介素1βMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-GCS 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的小鼠抗豚鼠IgG 规格 0.1ml
ANG(Human Angiogenin) ELISA Kit 人血管生长素 96T
Phospho-Rb (Ser807 + Ser811) 英文名称: 磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体 0.1ml
Cytosine deaminase 英文名称: 胞嘧啶脱酶抗体 0.2ml
Anti-GCS 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]培养悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。