人小细胞肺癌细胞；NCI-H209培养

细胞名称  人小细胞肺癌细胞；NCI-H209培养
形态特性 上皮样

品牌 悬浮聚集生长

特征特性 该细胞由Gazdar AF及其同事于1979年从一名小细胞肺癌患者的骨髓转移灶中分离建立，该骨髓标本的获取先于患者的治疗。该细胞是一种典型的小细胞性肺癌细胞，表达较高水平的4种生化标志：

神经特异性烯醇、肌酸激酶脑型同工酶、左旋多巴脱羧酶、铃蟾肽样免疫活性。c-myc DNA序列没有扩增；未发现大的结构DNA的异常；该细胞合成与正常肺相当量的p53 mRNA。该细胞以聚集体的形式悬浮生长，只有聚集体中的细胞是有活力的，但是细胞活率无法估计，一般培养基中含有大量的细胞碎片。该细胞表达异常的RB1蛋白，其706  

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS　

传代方法 1：

2传代；5~7天1次。  

传代情况 C5

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 培养法（-）　

STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11；D13S317：11；D16S539：9，12；D18S51：13；D19S433：14.2，15；D21S11：32.2；D2S1338：17，20；D3S1358：18，20；D5S818：12；D7S820：9；D8S1179：12，13；FGA：20，24；TH01：7，9；TPOX：8；vWA：18，19；

同工酶

染色体 　

使用权限 A类
人小细胞肺癌细胞；NCI-H209培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-Annexin V/PE 荧光素PE标记兔抗人、大、小鼠、Annexin V抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E(Ser209)抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

磷酸化活化复制因子2抗体 Anti-phospho-ATF2 0.1ml

ZAN 英文名称： 透明带黏附蛋白ZAN抗体 0.2ml

DOCK1 英文名称： 细胞质分裂付出蛋白1抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EIF4B (Ser540) 磷酸化真核翻译起始因子4B抗体 规格 0.1ml

phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E(Ser209)抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
TUBB(Human Beta-tubulin) ELISA kit 人β-微管蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-MARCKS 丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Ki-67 (Proliferation Marker) Ki67蛋白抗体 规格 0.1ml

TSH ELISA Kit 大鼠促甲状腺素 96T

PGF2 alpha 英文名称： 前列腺素F2a/PGF2 α抗体 0.2ml

C2orf60 英文名称： 2号染色体开放阅读框60抗体 0.2ml

Anti-MARCKS 丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
人β-1,3-半乳糖转移酶2(β3GALT2)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒，英文名：IgA ELISA Kit大鼠β-位淀粉样前体蛋白裂解酶2(βACE2)ELISA试剂盒，英文名：βACE2 ELISA Kit豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒，英文名：CGRP ELISA KiISA Kit for Human Serine--pyruvate aminotransferase小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒，英文名：INS ELISA KiISA Kit for Human Agrin小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒，英文名：STK ELISA KiISA Kit for Human Beta-1, 4-galactosyltransferase 5小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA试剂盒，英文名：P-PKC ELISA Kit人成纤维生长因子受体1（FGFR-1）ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠凝血因子Ⅸ(F9)ELISA试剂盒，英文名：F9 ELISA Kit

人硫代吗啉羧化物脱氢酶(CRYM) ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA试剂盒，英文名：Alox5 ELISA KiISA Kit for Human Aspartate aminotransferase, mitochondrial小鼠解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒，英文名：ADAM8 ELISA Kit人次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠胱天蛋白酶11(CASP11)ELISA试剂盒，英文名：CASP11 ELISA KiISA Kit for Human HDL-cholesterol小鼠端粒酶关联蛋白1(TEP1)ELISA试剂盒，英文名：TEP1 ELISA Kit人干扰素α2(IFN-alpha-2)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白细胞衍生趋化因子2(LECT2)ELISA试剂盒，英文名：LECT2 ELISA KiISA Kit for Human Insulin receptor小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA试剂盒，英文名：Slit2 ELISA Kit人α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒，英文名：PⅢNP ELISA Kit
品名 规格 备注

phospho-ZFP36L1(Ser334) 英文名称： 磷酸化锌指蛋白36抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R (Tyr723) 磷酸化巨噬细胞集落刺激因子受体抗体 规格 0.1ml

GPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶联受体30抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DeltaD 英文名称： DeltaD抗体 0.2ml

PPM1A PPM1A / PP2C-alpha 鼠单抗 (PE) Human
FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit 人胚胎性硫糖蛋白抗原Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-HHV8/ORF K2 类疱疹病毒8抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MG 鸡毒支原体抗体 规格 0.2ml

AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit 人腺苷酸环化酶1 96T

REG1 beta 英文名称： 胰岛细胞再生因子β抗体 0.2ml

C5orf49 英文名称： 5号染色体开放阅读框49抗体 0.2ml

Anti-HHV8/ORF K2 类疱疹病毒8抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。