EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0920培养

细胞名称  EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0920培养
形态特性 淋巴母细胞样

品牌 悬浮生长

特征特性 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

传代方法 1：

2传代；5-6天一次  

传代情况 P2

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 荧光法（-）　

STR -

同工酶

染色体

使用权限 A类

EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0920培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-YBX-1/FITC 荧光素标记高保留转录因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1) 趋化因子(C-X3-C 基元)配体1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体 Anti-AMACR/P504S 0.1ml

ZWILCH 英文名称： 着丝粒ZWILCH蛋白抗体 0.2ml

DEPDC1 英文名称： 细胞周期调控蛋白SDP35抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-FAK(Ser722) 磷酸化粘着斑激酶抗体 规格 0.1ml

cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1) 趋化因子(C-X3-C 基元)配体1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
uPA ELISA Kit 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Anthrax/FITC 荧光素标记抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM91A1 FAM91A1蛋白抗体 规格 0.2ml

sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1) ELISA Kit 人可溶性细胞间粘附分子1 96T

RNF59 英文名称： 环指蛋白59抗体 0.1ml

ACVR1B 英文名称： 激活素A受体1B抗体 0.2ml

Anti-Anthrax/FITC 荧光素标记抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
人胆固醇7α单氧酶(CYP7A1)ELISA试剂盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠Wnt-3a蛋白(WNT3A)ELISA试剂盒，英文名：WNT3A ELISA Kit人粘蛋白12(MUC12)ELISA试剂盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒，英文名：i-PTH ELISA Kit人胆汁酸受体(Bile acid receptor)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒，英文名：EMAb ELISA Kit人抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠胱硫醚γ裂解酶(CSE)ELISA试剂盒，英文名：CSE ELISA Kit人β葡糖苷酶2(GLU2B)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒，英文名：ER ELISA Kit人蛋白C(Pro-C)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠SHC转化蛋白1(SHC1)ELISA试剂盒，英文名：SHC1 ELISA Kit人胰腺再生蛋白1α(REG1α)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)ELISA试剂盒，英文名：MPP6 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Complement decay-accelerating factor小鼠17-酮类固醇(17-KS)ELISA试剂盒，英文名：17-KS ELISA Kit人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SIK2(Serine/threonine-protein kinase SIK2)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL.大鼠细胞周期素D3(CCND3)ELISA试剂盒，英文名：CCND3 ELISA Kit人Slit2 ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠前列腺酸性磷酸酶(ACP3)ELISA试剂盒，英文名：ACP3 ELISA Kit人TNF受体相关因子6(TNF receptor-associated factor 6)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒，英文名：MMP11 ELISA Kit人骨保护素(OPG)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ(DIO2)ELISA试剂盒，英文名：DIO2 ELISA Kit大鼠β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1(βACE1)ELISA试剂盒，英文名：βACE1 ELISA Kit豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒，英文名：TIMP-1 ELISA Kit
染色液 100ml 自产

ZNF704 英文名称： 锌指蛋白704抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CstF64(Ser498) 磷酸化细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体 规格 0.1ml

GRB2/ASH peptide 生长因子受体结合蛋白2抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DCUN1D2 英文名称： DCN1样蛋白2抗体 0.2ml

Oct4 Oct4 鼠单抗 (FITC) Human
CDK-4(Human Cyclin-dependent kinase 4) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶4Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-NPM (Ser4) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh IGSF3 免疫球蛋白超家族成员3抗体 规格 0.2ml

AAA(Human anti-Actin antibody) ELISA Kit 人抗肌动蛋白抗体 96T

phospho-PI3KCA(Tyr317) 英文名称： 磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亚单位A抗体 0.1ml

CD40L 英文名称： CD40L抗体 0.1ml

Anti-Phospho-NPM (Ser4) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml