详细介绍
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF价格
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:
2传代;5-6天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-HBeAg/FITC 荧光素标记小鼠抗人乙肝e抗原抗体(1)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Des(Desmin) 结蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
活化蛋白C抗体 Anti-APC 0.1ml
ZNF749 英文名称: 锌指蛋白749抗体 0.2ml
DAGLA 英文名称: 神经干细胞树突调节蛋白DAGLα抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Ephrin B(Tyr324/329) 磷酸化Ephrin B抗体 规格 0.1ml
Des(Desmin) 结蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
u-T3(Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA Kit 人高敏三碘甲状腺原氨酸Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-LH 促黄体生成素单克隆抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KLK6 激肽释放酶6抗体 规格 0.2ml
PDGFsR- Alpha ELISA Kit 大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α 96T
phospho-PYK2 (Tyr402) 英文名称: 磷酸化富含脯酸的酪酸激酶2抗体 0.1ml
CAB39L 英文名称: 钙结合蛋白样39抗体 0.2ml
Anti-LH 促黄体生成素单克隆抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
人二磷酸腺苷-核糖基环化酶2(BST1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA试剂盒,英文名:P-JNK ELISA KiISA Kit for Human Plaet-derived growth factor subunit A大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒,英文名:PⅠNP ELISA Kit人视黄酸受体应答蛋白2(RARRES2)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠中期因子(MK)ELISA试剂盒,英文名:MK ELISA KiISA Kit for Human Protein S100-A2大鼠信号传导转录激活因子3(STAT3)ELISA试剂盒,英文名:STAT3 ELISA Kit人线粒体肉毒碱/酰肉碱载体蛋白(mCAC)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠顺乌头酸酶1(ACO1)ELISA试剂盒,英文名:ACO1 ELISA Kit四氢生物蝶呤(Tetrahydrobiopterin)ELISA试剂盒通用96T0.78-50 uIU/mL大鼠亮氨酸丰富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA试剂盒,英文名:LRG1 ELISA Kit人扭转蛋白2A(TOR2A)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠谷丙转氨酶(ALT)ELISA试剂盒,英文名:ALT ELISA Kit
ELISA Kit for Human Complement C1q tumor necrosis factor-related protein 1小鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒,英文名:TIMP-1 ELISA Kit人视锥蛋白样蛋白1(VSNL1)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠丙酮酸脱氢酶α(PDHα)ELISA试剂盒,英文名:PDHα ELISA Kit大鼠B-淋巴细胞激活抗原B7-2(LAB7-2)ELISA试剂盒,英文名:LAB7-2 ELISA Kit人ADTRP ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒,英文名:TRAIL-R3 ELISA Kit人载脂蛋白A4(apo-A4)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠纤溶酶原激活剂抑制物(PAI-1)ELISA试剂盒,英文名:PAI-1 ELISA Kit人α血红蛋白稳定蛋白(AHSP)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠前白蛋白(PA)ELISA试剂盒,英文名:PA ELISA Kit1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2 D 3 / Calcitriol)ELISA试剂盒通用96T15.6-1000 pg/mL小鼠结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒,英文名:CTGF ELISA Kit
山羊抗大鼠 IgG(H+L)/HRP 0.1ml 美国Jackson公司分装
VGLL3 英文名称: 转录辅助因子退变样蛋白3抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATG4D(Ser341) 磷酸化自噬相关蛋白4D抗体 规格 0.1ml
NADPH peptide 还原型辅酶Ⅱ抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DIRAS1 英文名称: RAS相关抑细胞生长蛋白1抗体 0.2ml
Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-Influenza A Virus H1/HRP 辣根过氧化物酶标记羊抗季节性A型流感病毒H1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
GHRP-6 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 6) 醋酸促生长激素释放肽6Multi-class antibodies规格: 1g
凝血调节蛋白抗体 Anti-CD141 0.1ml
8-OHdG 英文名称: 8-羟基脱氧鸟苷抗体 0.1ml
phospho-Eph receptor B1 (Tyr928) 英文名称: 磷酸化酪酸蛋白激酶受体B1抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HDAC3 (Ser424) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶3抗体 规格 0.1ml
GHRP-6 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 6) 醋酸促生长激素释放肽6Multi-class antibodies规格: 1g