EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501培养

细胞名称  EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501培养
形态特性 淋巴母细胞样

品牌 悬浮生长

特征特性 该细胞来源于一正常男性的外周血。2005年由中国科学院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

传代方法 1：

2传代；5-6天一次  

传代情况 P7

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 荧光法（-）　

STR Amelogenin：XY；D8S1179：14,16；D21S11：30,33.2；D7S820：11,12；CSF1PO：10；D3S1358：17；TH01：7， 9；D13S317：8，12；D16S539： 11，12；D2S1338：,17,20；D19S433：13,14；vWA：19；THOX：8；D18S51：14,15；D5S818：10,11 ；FGA：24。

同工酶

染色体

使用权限 A类

EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-ZW10 peptide/FITC 荧光素标记着丝粒蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 结直肠癌缺失基因抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

膜粘连蛋白 Ⅳ抗体 Anti-Annexin Ⅳ 0.1ml

ZBTB5 英文名称： 锌指蛋白ZBTB5抗体 0.2ml

Dact2 英文名称： Dapper2蛋白抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204) 磷酸化原活化蛋白激酶ERK抗体 规格 0.1ml

DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 结直肠癌缺失基因抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
u-T4 ELISA Kit 大鼠高敏甲状腺素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-ULBP3/N2DL3 UL16结合蛋白3抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh GCET1 B淋巴细胞生发中心相关蛋白抗体 规格 0.2ml

CXCL16 ELISA Kit 大鼠CXC趋化因子配体16 96T

phospho-NFATc2(Ser330) 英文名称： 磷酸化核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 0.1ml

ADCY10 英文名称： 腺苷酸环化酶10抗体 0.2ml

Anti-ULBP3/N2DL3 UL16结合蛋白3抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
人二氢喋啶还原酶(DHPR)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒，英文名：Col Ⅰ ELISA KiISA Kit for Human Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒，英文名：gp130 ELISA Kit人粘蛋白2(MUC2)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒，英文名：PGF2α ELISA KiISA Kit for Human NADPH oxidase 1大鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒，英文名：Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit人脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒，英文名：T4 ELISA KiISA Kit for Progesterone大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒，英文名：OPG ELISA Kit人增殖细胞核抗原相关因子(PCNA-associated factor)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠胆囊收素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒，英文名：CCK ELISA Kit

人锌转运蛋白3(ZnT-3)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠胰岛素样蛋白3(INSL3)ELISA试剂盒，英文名：INSL3 ELISA KiISA Kit for Human POU domain, class 5, transcription factor 1大鼠白介素26(IL-26)ELISA试剂盒，英文名：IL-26 ELISA Kit人血小板衍生生长因子C(PDGF)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠KiSS-1受体(KISS1R)ELISA试剂盒，英文名：KISS1R ELISA KiISA Kit for Human Regucalcin大鼠活化素A(Activin-A)ELISA试剂盒，英文名：Activin-A ELISA Kit人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SIK1(Serine/threonine-protein kinase SIK1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠乙醇脱氢酶1(ADH1)ELISA试剂盒，英文名：ADH1 ELISA KiISA Kit for Human Somatostatin receptor type 2大鼠戊糖素(PTD)ELISA试剂盒，英文名：PTD ELISA Kit人α突触核蛋白(Alpha-synuclein)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒，英文名：NKB ELISA Kit
山羊抗大鼠 IgM/HRP 0.1ml 美国Jackson公司分装

VWF 英文名称： 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATG9A(Ser735) 磷酸化自噬相关蛋白9A抗体 规格 0.1ml

Nogo-B/A 轴索过度生长抑制因子-B/A抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Delta Opioid Receptor 英文名称： D型受体抗体 0.1ml

anti-AQP1 水通道蛋白1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 人补体片断3aMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-RNF126 环指蛋白126抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh GstP1/GST class-pi 谷胱甘肽硫转移酶pi基因抗体 规格 0.1ml

8-iso-PG(Mouse 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 小鼠8异前列腺素 96T

Oncomodulin 英文名称： 癌调蛋白/癌钙蛋白抗体 0.2ml

Bad 英文名称： 相关死亡促进因子Bad抗体 0.1ml

Anti-RNF126 环指蛋白126抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml