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人胚肾细胞(SV40T基因修饰);293T/17培养

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  • 型号
  • 品牌 ATCC
  • 厂商性质 经销商
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更新时间:2018-04-18 13:11:04浏览次数:391

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

人胚肾细胞(SV40T基因修饰);293T/17培养只能用于科研,不得用于临床。应用公司细胞库细胞株种类齐全:大鼠腹水癌细胞、肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株。细胞状态良好,饱满,光泽度好,*,专业技术指导。欢迎广大科研用户!

详细介绍

细胞名称  人胚肾细胞(SV40T基因修饰);293T/17培养
形态特性 上皮细胞

品牌 贴壁生长

特征特性 293细胞株插入SV40 T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。

培养条件 DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10%  

传代方法 消化5-15分钟。1:4-1:8。3天内可长满。

传代情况 P(17+5)

冻存条件 *培养基+8%DMSO

支原体检测 阴性 

STR

同工酶

染色体

使用权限 A类

人胚肾细胞(SV40T基因修饰);293T/17培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-FANCD2(phospho Ser222) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化FANCD2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Anti-Nebulin/FITC 荧光素标记伴肌动蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh C12ORF49 12号染色体开放阅读框49抗体 规格 0.2ml

PACAP/VIP receptor 腺苷酸环化酶激活肽/血管活性肠肽受体(抗原) 0.5mg

Centromeric histone H3-like protein-2 英文名称: 组蛋白H3样蛋白抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh RNF24 环指蛋白24抗体 规格 0.2ml

Anti-Nebulin/FITC 荧光素标记伴肌动蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
VC ELISA Kit 大鼠维生素CMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-ABCG2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠ABCG2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FKSG14/Centromere protein K 着丝粒蛋白K 规格 0.2ml

MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine) ELISA kit 人巨噬细胞来源的趋化因子 96T

phospho-MAP1LC3A(Ser12) 英文名称: 磷酸化自噬微管相关蛋白轻链3抗体 0.1ml

ACTH (7-23) 英文名称: 促肾上腺皮质激素ACTH (7-23)抗体 0.1ml

Anti-ABCG2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠ABCG2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
人核糖核酸酶A2(RNASE2)ELISA试剂盒人96T6.25-400 U/mL大鼠脂肪酸转运蛋白5(FATP5)ELISA试剂盒,英文名:FATP5 ELISA Kit豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒,英文名:IL12B ELISA KiISA Kit for Human Adenosine receptor A1小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒,英文名:Free-T3 ELISA Kit人载脂蛋白B(Apo-B)ELISA试剂盒人96T78-5000 ng/mL小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒,英文名:CT-1 ELISA KiISA Kit for Human Alpha-actinin-3小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒,英文名:GHRP ELISA Kitβ羟丁酸(beta-Hydroxybutyric acid)ELISA试剂盒通用96T0.156-10 umol/L小鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒,英文名:NGB ELISA KiISA Kit for Chondroitin sulfate小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒,英文名:MDC/CCL22 ELISA Kit

人胞裂蛋白5(SEPT5)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠尾加压素2受体(UTS2R)ELISA试剂盒,英文名:UTS2R ELISA KiISA Kit for Human Chondroitin sulfate proteoglycan 4小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒,英文名:CA ELISA KiISA Kit for Human Carbohydrate Antigen 50小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA试剂盒,英文名:BACE1 ELISA KiISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 3小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒,英文名:IGFBP-3 ELISA KiISA Kit for Human N(G), N(G)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 2小鼠粘蛋白1(MUC1)ELISA试剂盒,英文名:MUC1 ELISA KiISA Kit for Human Pro-epidermal growth factor小鼠微管关联蛋白2(MAP2)ELISA试剂盒,英文名:MAP2 ELISA KiISA Kit for Human Tissue factor小鼠轻肽神经丝蛋白(NEFL)ELISA试剂盒,英文名:NEFL ELISA Kit
鼠兔通用SP(HRP)试剂盒 140片 进口原料

Ubiquitin D 英文名称: 泛素D抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATF2(Ser94) 磷酸化活化复制因子2抗体 规格 0.1ml

N-ras 原癌基因抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

DUSP13 英文名称: 双特异性磷酸酶13抗体 0.2ml

Anti-ARF6 ADP核糖基化因子6抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-HBME-1 /FITC 荧光素标记间质细胞HBME1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Anti-TFAR19/PDCD5 /FITC 荧光素标记凋亡相关蛋白TFAR19抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗体 规格 0.2ml

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羟色胺受体4抗原 0.5mg

GRO Alpha 英文名称: 生长调节致癌基因-1抗体GROa 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗大鼠IgG 规格 0.1ml

Anti-TFAR19/PDCD5 /FITC 荧光素标记凋亡相关蛋白TFAR19抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

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