详细介绍
细胞名称 SV40T转化的人胚肾细胞;293T培养
形态特性 上皮细胞
品牌 贴壁生长
特征特性 293细胞株插入SV40 T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。
培养条件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:
2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶
染色体
使用权限 A类
SV40T转化的人胚肾细胞;293T培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 )ELISA Kit 大鼠可溶性凋亡相关因子Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Gold 胶体金标记的羊抗人IgG 规格 0.5ml
Hpt/HP ELISA Kit 大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白 96T
CDCA1 英文名称: 细胞分裂周期相关蛋白1抗体 0.2ml
phospho-B-Raf (Ser446) 英文名称: 磷酸化B-Raf抗体 0.1ml
Anti-STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
VCAM-1 人血管内皮细胞间粘附因子-1Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Calcitonin 降钙素抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NIR2 膜磷脂转移蛋白1抗体 规格 0.2ml
Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit 人溶酶体相关膜蛋白2 96T
TP53TG3 英文名称: p53靶蛋白3抗体 0.2ml
CENPN 英文名称: 着丝粒蛋白N抗体 0.1ml
Anti-Calcitonin 降钙素抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
人肌动蛋白束蛋白2(FSCN2)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒,英文名:PKR1 ELISA Kit人CC趋化因子受体4(CCR-4)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒,英文名:TRH ELISA KiISA Kit for Human Cyclic AMP-responsive element-binding protein 1小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒,英文名:Orexin A ELISA Kit人嗜酸粒细胞趋化蛋白2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/ml小鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒,英文名:CD44 ELISA KiISA Kit for Human CD40 ligand小鼠半乳糖凝集素3(Galectin-3)ELISA试剂盒,英文名:Galectin-3 ELISA Kit人Dickkopf样蛋白1(Dickkopf-like protein 1)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA试剂盒,英文名:Lpa ELISA KiISA Kit for Human Endothelin-converting enzyme 1小鼠信号素7A(SEMA7A)ELISA试剂盒,英文名:SEMA7A ELISA Kit
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠基质金属蛋白酶14(MMP14)ELISA试剂盒,英文名:MMP14 ELISA Kit人脂阀结构蛋白-1(Flotillin-1) ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠髓细胞触发受体1(TREM1)ELISA试剂盒,英文名:TREM1 ELISA KiISA Kit for Human Coagulation factor XIII A chain小鼠趋化因子C-C-基元受体8(CCR8)ELISA试剂盒,英文名:CCR8 ELISA Kit人生长抑制特异性蛋白1(GAS1)ELISA试剂盒人96T0.312-20ng/mL小鼠连环蛋白β1(CTNNβ1)ELISA试剂盒,英文名:CTNNβ1 ELISA KiISA Kit for Human Alanine aminotransferase 1小鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)ELISA试剂盒,英文名:ALOX12 ELISA Kit人70kDa热休克蛋白5(HSPA5)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)ELISA试剂盒,英文名:SCG2 ELISA KiISA Kit for Human Interferon alpha-inducible protein 6小鼠叉头框蛋白A2(FOXA2)ELISA试剂盒,英文名:FOXA2 ELISA Kit
水性封 10ml 适用于AEC.AP-Red. BCIP/NBT等
WDFY3 英文名称: WDFY3蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser353) 磷酸化细胞分裂周期蛋白25B抗体 规格 0.1ml
gp130/IL-6R 白介素-6受体抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DZIP3 英文名称: E3泛素蛋白连接酶dzip3抗体 0.2ml
Anti-ADK/AK 腺苷酸激酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-phospho-SHC (Tyr427) /FITC 荧光素标记磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
AR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受体(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
细胞核因子50/κ基因结合核因子50抗体 Anti-NF-κBp50 0.1ml
5-HTR2B 英文名称: 5-羟色胺受体2B抗体 0.1ml
Ezrin 英文名称: 埃兹蛋白抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体 规格 0.1ml
AR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受体(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg