详细介绍
细胞名称 人EB病毒转化的B细胞;CGM1培养
形态特性 淋巴细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性 EB转染B细胞
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
传代方法 1:
2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
人EB病毒转化的B细胞;CGM1培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1) shank1多肽抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-CD80/B7-1 刺激分子B7-1蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh OXSR1 氧化应激反应蛋白1抗体 规格 0.2ml
PTX3 Kit Human 人 PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-14 ELISA配对抗体 ELISA
CD70 英文名称: 坏死因子配体超家族成员7抗体 0.2ml
CCDC88B 英文名称: 大脑亮酸拉链结构域蛋白抗体 0.2ml
Anti-CD80/B7-1 刺激分子B7-1蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
VCAM-1/CD106 (Vascuolar cell adhesion molecule 1) 血管内皮细胞粘附分子抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(C端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCNA 增殖细胞核抗原抗体 规格 0.1ml
IL18BP Kit Human 人 IL18BP / IL18BPa ELISA配对抗体 ELISA
TYK3 英文名称: 酪酸蛋白激酶3抗体 0.2ml
CHK2 英文名称: 细胞周期检测点激酶2抗体 0.1ml
Anti-Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(C端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
人肌肽酶1(CNDP1)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒,英文名:β-DF ELISA KiISA Kit for Human Wnt inhibitory factor 1大鼠白介素1受体Ⅰ(IL1R1)ELISA试剂盒,英文名:IL1R1 ELISA Kit大鼠CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)ELISA试剂盒,英文名:CEBPβ ELISA Kit豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒,英文名:LTD4 ELISA Kit人醛脱氢酶家族16成员A1(ALDH16A1)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)ELISA试剂盒,英文名:IDO1 ELISA Kit人膜联蛋白A6(ANXA6)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/ml小鼠天冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒,英文名:AST ELISA Kit人B淋巴细胞白血病/淋巴瘤11B ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒,英文名:BGP/Gehrelin ELISA Kit
人心磷脂合成酶(CRLS1)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠生长分化因子15(GDF-15)ELISA试剂盒,英文名:GDF-15 ELISA Kit人小脑蛋白(Protein cereblon)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA试剂盒,英文名:cTnⅠ ELISA Kit人补体因子D(CFD)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)ELISA试剂盒,英文名:FGF6 ELISA Kit人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒,英文名:SP ELISA Kit人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒,英文名:IL-1β ELISA Kit人β-防御素14(β-DF14)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠血小板衍生生长因子B(PDGFB)ELISA试剂盒,英文名:PDGFB ELISA Kit人纤维母细胞生长因子20(FGF-20)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基1(SPTLC1)ELISA试剂盒,英文名:SPTLC1 ELISA Kit
胎血清(特优级) 16000-044 500ml Gibco
ZNF350 英文名称: 锌指蛋白350/癌易感基因1结合蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EEF2k (Ser366) 磷酸化真核延伸因子激酶2抗体 规格 0.1ml
FAK(Focaladhesin kinase) 粘着斑激酶抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DMP1 英文名称: 牙本质基质蛋白1抗体 0.2ml
TNF家族B细胞激活因子抗体 Anti-BAFF/CD257 0.1ml
Anti-Phospho-SirT1 (Ser27)/FITC 荧光素标记磷酸化沉默调节蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
一氧化氮合成酶-1抗体 Anti-NOS-1/bNOS/neuronal NOS/nNOS 0.1ml
5-HTR1B 英文名称: 5-羟色胺受体1B抗体 0.1ml
FAM62B 英文名称: 延伸突触蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser9) 磷酸化抑制基因P53抗体 规格 0.1ml
Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg