详细介绍
人胚肾细胞-F克隆;293F价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人胚肾细胞-F克隆;293F价格
形态特性 上皮样
品牌 贴壁生长;悬浮生长
特征特性
培养条件 悬浮培养用特制无血清培养基;贴壁培养用MEM-EBSS + NEAA + 10%FBS
传代方法
传代情况
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12,14;D16S539:,9,13;D18S51:17,18;D6S1043:11;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;Penta E:15;vWA:16,19;
同工酶
染色体
使用权限 B类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-Calpain 1/FITC 荧光素标记钙蛋白酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-GTSE-1/FITC 荧光素标记G2期、S期应答相关蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CHFR 泛素连接酶蛋白CHFR抗体 规格 0.2ml
USF-1(upstream stimulatory factor 1) 上游刺激因子1抗原 0.5mg
CD51 英文名称: 整合素αV抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh TMPRSS5 跨膜丝氨酸蛋白酶5抗体 规格 0.2ml
Anti-GTSE-1/FITC 荧光素标记G2期、S期应答相关蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
VCAM-1/CD106 ELISA kit 大鼠血管内皮细胞粘附分子Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-ARIP2B/FITC 荧光素标记激活素受体2B/激活素受体相互作用蛋白2b抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM134C FAM134C蛋白抗体 规格 0.2ml
Lptn/LTN/XCL1(Human lymphotactin) ELISA Kit 人淋巴细胞趋化因子 96T
MrpL28 英文名称: 线粒体核糖体蛋白L28抗体 0.1ml
phospho-AMPK alpha 2 (Ser491) 英文名称: 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 0.1ml
Anti-ARIP2B/FITC 荧光素标记激活素受体2B/激活素受体相互作用蛋白2b抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
人基质细胞衍生因子1(SDF-1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)ELISA试剂盒,英文名:3-OMD ELISA KiISA Kit for Human Mitogen-activated protein kinase 14大鼠微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒,英文名:MAP-2 ELISA KiISA Kit for Human Microphthalmia-associated transcription factor大鼠皮质酮(CORT)ELISA试剂盒,英文名:CORT ELISA KiISA Kit for Human Neogenin大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒,英文名:MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA KiISA Kit for Human Pleckstrin homology domain-containing family O member 1大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒,英文名:T ELISA KiISA Kit for Human cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit alpha大鼠别孕烯醇酮/3α,5α-四氢孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA试剂盒,英文名:AP/3α,5α-THP ELISA KiISA Kit for Human Peroxiredoxin-4大鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒,英文名:CRP ELISA Kit
ELISA Kit for Dihydrotestosterone小鼠组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA试剂盒,英文名:TIMP4 ELISA KiISA Kit for Human Lithostathine-1-beta大鼠脂肪酸合酶(FASN)ELISA试剂盒,英文名:FASN ELISA KiISA Kit for Human Spermine oxidase大鼠微纤丝关联蛋白4(MFAP4)ELISA试剂盒,英文名:MFAP4 ELISA KiISA Kit for Human NAD-dependent ADP-ribosyltransferase sirtuin-4大鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)ELISA试剂盒,英文名:uPAR ELISA KiISA Kit for Human RISC-loading complex subunit TARBP2大鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)ELISA试剂盒,英文名:IκBα ELISA KiISA Kit for Human Ceramide glucosyltransferase大鼠簇集蛋白(CLU)ELISA试剂盒,英文名:CLU ELISA Kit大鼠Slit同源物1(Slit1)ELISA试剂盒,英文名:Slit1 ELISA Kit
胎血清(特优级) 500ml Hyclone
ZNF263 英文名称: 锌指蛋白263抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体 规格 0.1ml
FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡结构域相关蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DYRK2 英文名称: 双特异性酪酸磷酸化调节激酶DYRK2抗体 0.2ml
β-酪蛋白(抗体)兔抗山羊、绵羊 Anti-Beta-casein 0.1ml
Anti-SLC4A4/FITC 荧光素标记碳酸氢钠协同转运蛋白4-A4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ACA11 peptide 拟南芥ACA11蛋白多肽抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
一氧化氮合成酶-3抗体 Anti-NOS-3/eNOS 0.1ml
5-HTR1A 英文名称: 5-羟色胺受体1A抗体 0.1ml
EB2 英文名称: 微管相关末端结合蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser46) 磷酸化抑制基因P53抗体 规格 0.1ml
ACA11 peptide 拟南芥ACA11蛋白多肽抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg