Asp2人胚胎肾细胞转化细胞；FC33培养

细胞名称  Asp2人胚胎肾细胞转化细胞；FC33培养
形态特性 上皮样；多角　

品牌 贴壁生长　

特征特性 带有编码多组氨酸的Asp-2基因转染293细胞，用于阿尔茨海默病的研究；表达Asp-2基因。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；250ug/ml G418  

传代方法 1：

3传代；3~4天1次。  

传代情况 不详

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 培养法（-）　

STR 　

同工酶

染色体 　

使用权限 A类
Asp2人胚胎肾细胞转化细胞；FC33培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
INS ELISA Kit 大鼠胰岛素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Na,K-ATPase alpha-1 (Phospho Ser23) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FABPB 脑型脂肪酸结合蛋白抗体 规格 0.2ml

pACCase ELISA Kit 大鼠磷酸化乙酰辅酶A羧化酶 96T

CCL3 英文名称： 巨噬细胞炎症因子1α抗体 MIP-1α 0.1ml

AP2 beta 英文名称： 衔接蛋白β抗体 0.1ml

Anti-Na,K-ATPase alpha-1 (Phospho Ser23) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
VD3 ELISA Kit 大鼠维生素D3Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-ADRB2/FITC 荧光素标记肾上腺素能受体β2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FCHSD1 FCHSD1蛋白抗体 规格 0.2ml

Mouse trypsin ELISA Kit 小鼠胰蛋白酶 96T

MAP1LC3A 英文名称： 自噬微管相关蛋白轻链3抗体 0.1ml

ADAM12 英文名称： 去整合素样金属蛋白酶12 0.2ml

Anti-ADRB2/FITC 荧光素标记肾上腺素能受体β2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
人毛球族同族体3(TRB-3)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠激肽释放酶6(KLK6)ELISA试剂盒，英文名：KLK6 ELISA KiISA Kit for Human Plaet-activating factor acetylhydrolase IB subunit gamma大鼠白介素2(IL－2)ELISA试剂盒，英文名：IL－2 ELISA Kit人磷脂酰肌醇聚糖合成类蛋白F(PIG-F)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA试剂盒，英文名：Flt3L ELISA KiISA Kit for Human Ras-related protein Rab-*鼠白细胞介素2(IL-2)ELISA试剂盒，英文名：IL-2 ELISA Kit人精液凝固蛋白1(Semenogelin-1)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)ELISA试剂盒，英文名：IGFBP5 ELISA KiISA Kit for Human Semaphorin-3A大鼠吻素1(KISS1)ELISA试剂盒，英文名：KISS1 ELISA Kit人分泌型卷曲蛋白1 (FRP-1)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠色胺酸羟化酶1(TPH1)ELISA试剂盒，英文名：TPH1 ELISA Kit

人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠二价金属转运蛋白1(DMT1)ELISA试剂盒，英文名：DMT1 ELISA KiISA Kit for Human E-selectin大鼠淋巴毒素β(LTβ)ELISA试剂盒，英文名：LTβ ELISA KiISA Kit for Human Thyroid hormone receptor alpha大鼠谷光甘肽合成酶(GSS)ELISA试剂盒，英文名：GSS ELISA KiISA Kit for Human Versican core protein大鼠丙酮酸脱氢酶激酶同工酶4(PDK4)ELISA试剂盒，英文名：PDK4 ELISA Kit大鼠B-淋巴细胞趋化因子1(BLC1)ELISA试剂盒，英文名：BLC1 ELISA KiISA Kit for Human Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒，英文名：TRAIL-R4 ELISA KiISA Kit for Human Arachidonate 12-lipoxygenase, 12S-type小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒，英文名：PAI-1 ELISA Kit
兔抗IgG血清 0.5ml 国产

WFS1 英文名称： Wolfram综合征蛋白1抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Thr91) 磷酸化原癌基因c-Jun抗体 规格 0.1ml

HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DRD5 英文名称： 多巴胺受体D5抗体 0.1ml

Anti-AAT α-1抗胰蛋白酶抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Anti-TGF- Beta3/FITC 荧光素标记转移生长因子–β3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

NIK，NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB诱导的激酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

P物质抗体 Anti-SP 0.1ml

5HT3C 英文名称： 5-羟色胺受体3C抗体 0.1ml

eEF1A1 英文名称： 翻译延伸因子EF-1a抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAPK14(Thr180) 磷酸化p38MAPK抗体 规格 0.1ml

NIK，NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB诱导的激酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg