人外周淋巴细胞；U266B1培养

细胞名称  人外周淋巴细胞；U266B1培养
形态特性 淋巴母细胞样

品牌 悬浮生长

特征特性 该细胞系是由N.K. Nilsson于1970年从一名53岁患有骨髓瘤男性的外周血中分离建立的。免疫学研究表明，该细胞和体内骨髓瘤细胞表达相同的免疫球蛋白。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS　

传代方法 1：

3传代,2-3天传一代  

传代情况 C8

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR

同工酶 同工酶鉴定

染色体

使用权限 A类

人外周淋巴细胞；U266B1培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit 人可溶性蛋白185Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-SLC16A3/MCT-4 MCT4抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗大鼠IgG 规格 0.1ml

TRAb ELISA Kit 大鼠抗促甲状腺素受体抗体 96T

ASP4 英文名称： 天冬酸蛋白酶ASP4抗体 0.2ml

BRN3B 英文名称： 脑特定蛋白Brn3B抗体 0.1ml

Anti-SLC16A3/MCT-4 MCT4抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
VEGFR-3/Flt-4(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) /FITC 荧光素标记磷酸化PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Goat IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的驴抗羊IgG 规格 0.1ml

PCDH1(Human Interleukin-2 receptor,IL-2R) ELISA Kit 人原钙黏素1 96T

LDHC(Cancer,testis antigen 32) 英文名称： 乳酸脱氢酶LDH-C(/抗原32)抗体 0.1ml

ARA24 英文名称： 雄激素受体相关蛋白24抗体 0.2ml

Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) /FITC 荧光素标记磷酸化PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
人同型半胱氨酸敏感内质网泛素样结构域蛋白成员1(HERP1) ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒，英文名：BMP2 ELISA KiISA Kit for Human Thiomorpholine-carboxylate dehydrogenase小鼠花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒，英文名：AA ELISA KiISA Kit for Human Scavenger receptor cysteine-rich type 1 protein M130小鼠补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒，英文名：C3a ELISA KiISA Kit for Human C-reactive protein小鼠L-乳酸脱氢酶A链(LDH-A)ELISA试剂盒，英文名：LDH-A ELISA KiISA Kit for Human Cadherin-1小鼠白介素1受体拮抗剂(IL-1RA)ELISA试剂盒，英文名：IL-1RA ELISA KiISA Kit for Human Beta-defensin 1小鼠血红蛋白(HB)ELISA试剂盒，英文名：HB ELISA KiISA Kit for Human Protein FAM151A小鼠嗜铬蛋白B(CHGB)ELISA试剂盒，英文名：CHGB ELISA Kit

ELISA Kit for Human Heat shock protein HSP 90-alpha小鼠低密度脂蛋白受体衔接蛋白1(LDLRAP1)ELISA试剂盒，英文名：LDLRAP1 ELISA KiISA Kit for Human Phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D小鼠膜铁转运蛋白(FPN)ELISA试剂盒，英文名：FPN ELISA KiISA Kit for Human High mobility group protein B1小鼠海藻糖酶(TREH)ELISA试剂盒，英文名：TREH ELISA KiISA Kit for Human Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K小鼠单核细胞趋化蛋白5(MCP5)ELISA试剂盒，英文名：MCP5 ELISA KiISA Kit for Human Interferon alpha/beta receptor 2小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒，英文名：UGCG ELISA KiISA Kit for Human KiSS-1 receptor小鼠1,25-二羟基维生素D3(DHVD3)ELISA试剂盒，英文名：DHVD3 ELISA KiISA Kit for Human Lipopolysaccharide-binding protein大鼠循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒，英文名：CIC ELISA Kit
兔抗羊IgG-纯化抗体 1mg/10mg 国产

CHI3L2 英文名称： 软骨细胞蛋白39抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Cortactin (Tyr466) 磷酸化皮层肌动蛋白抗体 规格 0.1ml

HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DCAF13 英文名称： DCAF13蛋白抗体 0.2ml

Anti-2,4-D 2，4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit 豚鼠卵清蛋白特异性IgGMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr142) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CXorf36 脱羧酶蛋白体36抗体 规格 0.2ml

2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶联血清白蛋白 1mg

Kv4.2 英文名称： 电压门控性钾通道蛋白Kv4.2抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh WDR79/TCAB1 端粒酶卡哈尔体蛋白抗体 规格 0.2ml

Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr142) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml