详细介绍
人胚肺细胞VA13细胞;WI-38VA13亚系2RA价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人胚肺细胞VA13细胞;WI-38VA13亚系2RA价格
形态特性 成纤维细胞样
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞系衍生自WI-38细胞。WI-38细胞感染低滴度的SV40病毒,经过连续传代、克隆选择获得多株亚系,其中2RA亚系含有SV40 neo (T)和转移抗原,从而改变其有限细胞系的特性,可在常规条件下连续传代。该细胞系的实验操作甚少在生物安全P2级条件下进行。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C265
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
cAMP ELISA Kit 大鼠环磷酸腺苷Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-ARC/FITC 荧光素标记ARC抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM154A FAM154A蛋白抗体 规格 0.2ml
E-Cad(Mouse E-Cadherin) ELISA Kit 小鼠E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白 96T
Angiotensin II Type 2 Receptor 英文名称: 血管紧张素Ⅱ2型受体相互作用蛋白抗体 0.1ml
Annexin A11 英文名称: 膜粘连蛋白11抗体 0.2ml
Anti-ARC/FITC 荧光素标记ARC抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 内脂素/内脏脂肪素(人:N端多肽)、内脏脂肪素、 又称:前B细胞克隆增强因子、内肥素、腹脂素Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-ICAM-3/CD50 细胞间粘附分子-3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh P2Y4 P2Y4受体抗体 规格 0.1ml
CD86 Kit Rat 大鼠 CD86 / B7-2 ELISA配对抗体 ELISA
T2R60 英文名称: 味觉受体蛋白家族2亚基60抗体 0.2ml
C3orf26 英文名称: 3号染色体开放阅读框26抗体 0.2ml
Anti-ICAM-3/CD50 细胞间粘附分子-3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
人晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)ELISA试剂盒人96T6.25-400 pg/mL小鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒,英文名:Cyclin-D2 ELISA Kit人谷氨酸脱羧酶(GAD)ELISA试剂盒人96T0.39-25 ng/mL小鼠己糖激酶1(HK1)ELISA试剂盒,英文名:HK1 ELISA KiISA Kit for Human Hyaluronidase-4小鼠谷胱甘肽S转移酶θ1(GSTθ1)ELISA试剂盒,英文名:GSTθ1 ELISA Kit人90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠蛋白磷酸酶3调节因子亚基1(PPP3R1)ELISA试剂盒,英文名:PPP3R1 ELISA Kit人干扰素调节因子3(IRF3)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠α白蛋白(AFM)ELISA试剂盒,英文名:AFM ELISA Kit人犬尿氨酸酶(Kynureninase)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA试剂盒,英文名:HSP90αA1 ELISA Kit人晚期角质化包膜蛋白3D (Late cornified envelope protein 3D)ELISA试剂盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒,英文名:IGF-2 ELISA Kit
人和肽素(CPP)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)ELISA试剂盒,英文名:G6PD ELISA Kit人DNA错配修复蛋白MSH2(hMSH2)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠晚期氧化蛋白产物(AOPP)ELISA试剂盒,英文名:AOPP ELISA Kit人Myocardin(MYOCD)ELISA试剂盒人96T0.156-10 nmol/mL大鼠牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒,英文名:CIAP ELISA Kit人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒,英文名:AmAC-1 ELISA Kit人磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶和双特异性蛋白磷酸酶PTEN(PTEN)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠高迁移率族蛋白1(HMGB1)ELISA试剂盒,英文名:HMGB1 ELISA Kit人受磷蛋白(PLN)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒,英文名:PY ELISA Kit人髓鞘脂蛋白脂质蛋白(PLP)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒,英文名:CXCR3 ELISA Kit
细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂 100次
Phospho-ZAP70 (Tyr315 + Tyr319) 英文名称: 磷酸化zeta相关蛋白70抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser471) 磷酸化原癌基因c-Raf抗体 规格 0.1ml
H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
phospho-DDX5 (Tyr593) 英文名称: 磷酸化三磷酸腺苷依赖解旋酶ddx5抗体 0.1ml
Sox2 Sox2 鼠单抗 (FITC) Human
ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅱ受体1Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-phospho-P53 (Ser46) 磷酸化抑制基因P53抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSP20 热休克蛋白-20抗体 规格 0.2ml
17-OHP(Mouse 17-Hydroxyprogesterone)ELISA Kit 小鼠17羟孕酮 96T
PEG3 英文名称: PEG3蛋白抗体 0.1ml
phospho-CDK5(Tyr15) 英文名称: 磷酸化周期素依赖性激酶5抗体 0.1ml
Anti-phospho-P53 (Ser46) 磷酸化抑制基因P53抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml