人二倍体细胞；HEL培养

细胞名称  人二倍体细胞；HEL培养
形态特性 成纤维细胞样　

品牌 贴壁生长

特征特性 HEL是一株人二倍体细胞系，具有典型的成纤维细胞形态，染色体2n＝46。可用于作多种病毒的宿主，抗衰老药物试验等。

培养条件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

传代方法 1：

3传代,2-3天传一代  

传代情况 C19

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR STR鉴定

同工酶

染色体

使用权限 A类
人二倍体细胞；HEL培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
F VII (Human coagulation factor VII ) ELISA Kit 人凝血因子ⅦMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HDLBP/vigilin 高密度脂蛋白结合蛋白抗体 规格 0.2ml

INH-A ELISA Kit 大鼠抑制素A 96T

AMPKγ2 英文名称： 腺苷单磷酸活化蛋白激酶γ2抗体 0.2ml

C2orf49 英文名称： 2号染色体开放阅读框49抗体 0.2ml

Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
VK1 ELISA Kit 大鼠维生素K1Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-ADRA2/FITC 荧光素标记alpha-2肾上腺素能受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FECH/Ferrochelatase 铁螯合酶抗体 规格 0.2ml

HL ELISA Kit 大鼠肝脂酶 96T

MYBPC1 英文名称： 肌球蛋白结合蛋白C抗体 0.2ml

AX2R 英文名称： 膜粘连蛋白2受体抗体 0.2ml

Anti-ADRA2/FITC 荧光素标记alpha-2肾上腺素能受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
人维生素D结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠抗肌萎蛋白(UTRN)ELISA试剂盒，英文名：UTRN ELISA Kit人高尔基蛋白73(GP73)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠晶状体蛋白αB(CRYαB)ELISA试剂盒，英文名：CRYαB ELISA Kit人E3泛素蛋白连接酶HUWE 1(E3 ubiquitin-protein ligase HUWE1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒，英文名：GAPDH ELISA KiISA Kit for Human Nicotinamide phosphoribosyltransferase大鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒，英文名：CT ELISA Kit吡啶酚(Pyridinoline)ELISA试剂盒通用96T6.25-400 nmol/L大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒，英文名：BMPR-Ⅱ ELISA KiISA Kit for Human Xaa-Pro dipeptidase大鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒，英文名：PRG4 ELISA Kit人前胸腺素α（Prothymosin alpha）ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)ELISA试剂盒，英文名：IL-2sRβ ELISA Kit

人β氨基己糖苷酶β(HEXB)ELISA试剂盒人96T1.56-100 U/mL小鼠干扰素γ诱导单核因子(MIγ)ELISA试剂盒，英文名：MIγ ELISA KiISA Kit for Human Pyruvate kinase isozymes M1/M2大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒，英文名：NAG ELISA Kit人蛋白信号调节因子1(RGS1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠粒细胞巨噬细胞集落激因子(GMCSF/CSF2)ELISA试剂盒，英文名：GMCSF/CSF2 ELISA KiISA Kit for Human Syntenin-1大鼠音猬因子(SHH)ELISA试剂盒，英文名：SHH ELISA Kit人锌指蛋白2(SNAI2)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠细胞绒毛蛋白(CVL)ELISA试剂盒，英文名：CVL ELISA KiISA Kit for Human Serpin B3大鼠神经生长因子诱导蛋白B(NGFIB)ELISA试剂盒，英文名：NGFIB ELISA Kit人皮质醇结合球蛋白ELISA试剂盒人96T39-2500 nmol/L大鼠硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)ELISA试剂盒，英文名：HSPG ELISA Kit
纤维素膜(15×60cm 0.45um) 1张 Pall-Gelman

ZNF312 英文名称： 锌指蛋白312抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-DDX58 (Ser8) 磷酸化DDX58抗体 规格 0.1ml

GAD-67 (glutamate decarboxylase 67) 谷氨酸脱羧酶-67抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DCIR/CLEC4A 英文名称： C型凝集素结构域家族4成员A抗体 0.2ml

CLEC7A Dectin-1 / CLEC7A 兔单抗 (PE) Mouse
Human thyroxineT4 ELISA Kit 人甲状腺素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体(大鼠潜在病毒KRV)C端 规格 1ml

17-OHP ELISA Kit 大鼠17羟孕酮 96T

Protein C inhibitor 英文名称： 蛋白C抑制因子抗体 0.1ml

CD4 英文名称： CD4抗体 0.1ml

Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。