详细介绍
细胞名称 人淋巴细胞;1301培养
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法
传代情况 Unknown
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
人淋巴细胞;1301培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
PCNA 大鼠增殖细胞核抗原Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-EGFR 表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Myf6 生肌调节因子6抗体 规格 0.2ml
C3bR(Human Complement fragment 3b rccptor) ELISA Kit 人补体片段3b受体 96T
Alpha SNAP 英文名称: 可溶性附着蛋白α-SNAP抗体 0.2ml
CCN1 英文名称: 富半胱酸肝素结合蛋白61抗体 0.1ml
Anti-EGFR 表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
VLDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit 人极低密度脂蛋白受体Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-LAMR1 层粘连蛋白受体1抗体(N端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh ITGB4 整合素β4抗体 规格 0.1ml
EPO ELISA Kit 大鼠红细胞生成素 96T
Piccolo 英文名称: 神经细胞突触蛋白PCLO抗体 0.2ml
C20orf4 英文名称: 20号染色体开放阅读框4抗体 0.2ml
Anti-LAMR1 层粘连蛋白受体1抗体(N端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
人硒蛋白P1(SEPP1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠碳酸酐酶Ⅱ(CA2)ELISA试剂盒,英文名:CA2 ELISA KiISA Kit for Hyaluronic acid小鼠胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA试剂盒,英文名:CASP14 ELISA Kit人高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)ELISA试剂盒人96T12.5-800 ng/mL小鼠对氧磷酶1(PON1)ELISA试剂盒,英文名:PON1 ELISA KiISA Kit for Human Acetolactate synthase-like protein小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒,英文名:CST3 ELISA Kit人胰岛素受体(ISR)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠Slit同源物3(Slit3)ELISA试剂盒,英文名:Slit3 ELISA KiISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding protein 1小鼠Ⅳ型胶原(COL4)ELISA试剂盒,英文名:COL4 ELISA Kit人亮氨酰/半胱氨酰氨肽酶(Cystinyl aminopeptidase)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠脂多糖(LPS)ELISA试剂盒,英文名:LPS ELISA Kit
人质子肌醇转运蛋白ELISA试剂盒人96T0.47-30 ng/mL大鼠膜联蛋白A5(ANXA5)ELISA试剂盒,英文名:ANXA5 ELISA KiISA Kit for Human Lysozyme C大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒,英文名:TSP-1 ELISA Kit人细胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase subunit 3)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒,英文名:MTL ELISA KiISA Kit for Human Microtubule-associated protein 2大鼠神经丝蛋白(NF)ELISA试剂盒,英文名:NF ELISA Kit人基质金属蛋白酶7(MMP-7/MAT)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠内毒素(ET)ELISA试剂盒,英文名:ET ELISA KiISA Kit for Human NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 7, mitochondrial大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒,英文名:ATGA/TGAB ELISA Kit人氧化低密度脂蛋白受体1(Ox-LDL receptor 1)ELISA试剂盒人96T9.375-600 pg/mL大鼠环加氧酶1(COX-1)ELISA试剂盒,英文名:COX-1 ELISA Kit
小鼠IgG干粉 10mg/50mg/100mg 国产
WDR19 英文名称: WD重复膜蛋白19抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1A/P21 (Ser130) 磷酸化p21蛋白抗体 规格 0.1ml
IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白细胞介素-16抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DOK7 英文名称: 接头蛋白DOK7抗体 0.1ml
Anti-Phospho-Ack1(Tyr326) 磷酸化Ack1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Human Beta-glucosidase ELISA Kit 人β葡糖苷酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-NIT2 NIT2蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-15 白介素15抗体 规格 0.1ml
17-KS ELISA Kit 大鼠17-酮类固醇 96T
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716) 英文名称: 磷酸化血小板源性生长因子受体B抗体 0.1ml
C8orf30A 英文名称: 8号染色体开放阅读框30a抗体 0.2ml
Anti-NIT2 NIT2蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。