人胚肺成纤维细胞；IMR-90培养

细胞名称  人胚肺成纤维细胞；IMR-90培养
形态特性 成纤维细胞

品牌 贴壁生长

特征特性 W.W. Nichols及其同事从一位16周女婴的肺中取材，建立了人二倍体成纤维细胞株IMR-90。 [22381] 分裂潜能，病毒感受性和其它性质都得到了充分研究，因而这株细胞可以作为WI-38或其它标准人肺细胞株的替代株。 有报道称这株细胞在表现出衰老前可倍增58次。 [22381]

培养条件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清，10%  

传代方法 消化3-5分钟。1：

2。3天内可长满。  

传代情况 P(11+5)

冻存条件 *培养基+8%DMSO

支原体检测 阴性　

STR

同工酶

染色体

使用权限 A类
人胚肺成纤维细胞；IMR-90培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-p-Nrf2/FITC 荧光素标记磷酸化核因子2相关因子2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-CD8/PE 荧光素藻红蛋白标记兔抗人、大、小鼠CD8抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CD25/白介素2-受体抗体 Anti-CD25/IL-2RA 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgM/RBITC 罗丹明标记的羊抗小鼠IgM 0.3ml

AFF2 英文名称： 脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLGLB2 纤溶酶相关蛋白B2抗体 规格 0.2ml

Anti-CD8/PE 荧光素藻红蛋白标记兔抗人、大、小鼠CD8抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-GAPDH 兔抗3-磷酸甘油醛脱氢酶单克隆抗体(内参抗体)Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser296) 磷酸化原癌基因c-Raf抗体 规格 0.1ml

兔抗猴IgG纯化抗体 1mg/10mg 国产

Phospho-YB1(Ser102) 英文名称： 磷酸化DNA结合蛋白B抗体 0.1ml

DPY19L1 英文名称： 短粗矮胖19蛋白样1抗体 0.2ml

Anti-GAPDH 兔抗3-磷酸甘油醛脱氢酶单克隆抗体(内参抗体)Multi-class antibodies规格： 0.1ml
人纤维胶凝蛋白2(FCN2)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠神经型一氧化氮合酶()ELISA试剂盒，英文名： ELISA KiISA Kit for Human Keratin, type I cytoskeletal 18大鼠转化生长因子β激蛋白22(TSC22)ELISA试剂盒，英文名：TSC22 ELISA Kit人氧鲨烯环化酶(OSC)ELISA试剂盒人96T0.312-20 nmol/mL大鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒，英文名：PI ELISA KiISA Kit for Human Major facilitator superfamily domain-containing protein 2A大鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)ELISA试剂盒，英文名：cTn-T ELISA Kit人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)ELISA试剂盒人96T1.56-100 U/L大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒，英文名：MPO ELISA KiISA Kit for Human Promotilin大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒，英文名：GIP ELISA Kit人神经纤维介质多肽(NF-M)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒，英文名：sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Fibroblast growth factor 6小鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)ELISA试剂盒，英文名：uPAR ELISA KiISA Kit for Human Necdin大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒，英文名：SDF-1β/CXCL12 ELISA Kit人N乙酰胞壁酸L酰胺酶 ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠谷氨酸脱羧酶1(GAD1)ELISA试剂盒，英文名：GAD1 ELISA KiISA Kit for Human Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒，英文名：Big ET ELISA KiISA Kit for Human Proteoglycan 4大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)ELISA试剂盒，英文名：α-SMA ELISA KiISA Kit for Human Regulator of G-protein signaling 19大鼠白细胞介素13(IL-13)ELISA试剂盒，英文名：IL-13 ELISA KiISA Kit for Human Protein S100-A*鼠心肌营养素1(CT1)ELISA试剂盒，英文名：CT1 ELISA Kit
羊抗IgG血清 0.5ml 国产

CCBR1 英文名称： 钙离子通道阻端耐药蛋白CCBR1抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-c-Kit(Tyr703) 磷酸化原癌基因c-kit抗体 规格 0.1ml

HDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 组织蛋白去乙酰化酶1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DVL3 英文名称： DVL3蛋白抗体 0.2ml

Anti-5-HTT 5-羟色胺转运蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
FGF-10(Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 )ELISA Kit 大鼠成纤维细胞生长因子10Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Stanniocalcin 1 斯钙素抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的羊抗人IgG 规格 0.1ml

15-LO/LOX ELISA Kit 大鼠15脂加氧酶 96T

Nidogen2 英文名称： 骨巢蛋白抗体 0.2ml

Phospho-Bcl-2(Thr129) 英文名称： 磷酸化Bcl-2抗体 0.1ml

Anti-Stanniocalcin 1 斯钙素抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml