人正常乳腺上皮细胞；MCF10A培养

细胞名称  人正常乳腺上皮细胞；MCF10A培养
形态特性 上皮细胞样

品牌 贴壁生长

特征特性

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

传代方法 1：

2。3天内可长满。  

传代情况97

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR

同工酶

染色体

使用权限 B类
人正常乳腺上皮细胞；MCF10A培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-phospho-FOXO4 (phospho S197) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-NKR/Neurokin B receptor /FITC 荧光素标记神经激肽-B受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BTBD1/HCV NS5A transactivated protein 8 丙肝病毒NS5A反转录蛋白8抗体 规格 0.2ml

ASCL1/MASH1(Achaete-scute homolog 1) 神经母细胞特异性转移因子抗原 0.5mg

Acetyl-Histone H4(K8) 英文名称： 乙酰化组蛋白H4抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh RIPK3 受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3抗体 规格 0.1ml

Anti-NKR/Neurokin B receptor /FITC 荧光素标记神经激肽-B受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
VZV-IgG(Human Varicella zoster virus IgG) ELISA Kit 人水痘带状疱疹病毒IgGMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Kiss-1 转移抑制基因抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh LASS5 长寿相关基因lASS5抗体 规格 0.2ml

5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 人5羟色胺 96T

PAI1 英文名称： 内皮细胞纤溶酶原激活抑制蛋白1抗体 0.2ml

Cux2 英文名称： 转录同源蛋白质CUX2抗体 0.1ml

Anti-Kiss-1 转移抑制基因抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
人信号肽,CUB和EGF样结构域蛋白1(SCUBE1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠小白蛋白(PVALB)ELISA试剂盒，英文名：PVALB ELISA KiISA Kit for Inositol trisphosphate小鼠成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)ELISA试剂盒，英文名：FGFR3 ELISA Kit人白介素26(IL-26)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)ELISA试剂盒，英文名：NT-ProBNP ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-5 receptor subunit alpha小鼠EB病毒诱导蛋白3(EBI3)ELISA试剂盒，英文名：EBI3 ELISA Kit人角蛋白Ⅱ型表皮细胞骨架2 (Keratin, type II cytoskeletal 2 epidermal)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠自然抗性相关巨噬细胞蛋白1(NRAMP-1)ELISA试剂盒，英文名：NRAMP-1 ELISA KiISA Kit for Human Phosphatidylcholine-sterol acyltransferase大鼠胰高血糖素样肽2(Glp-2)ELISA试剂盒，英文名：Glp-2 ELISA Kit褪黑激素(Melatonin)ELISA试剂盒通用96T15.6-1000 pg/mL大鼠信号转导分子7(Smad7)ELISA试剂盒，英文名：Smad7 ELISA Kit

人促胰液素(Secretin)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠乳酸脱氢酶B(LDHB)ELISA试剂盒，英文名：LDHB ELISA KiISA Kit for Human Membrane metallo-endopeptidase-like 1大鼠髓样细胞触发性受体2(TREM2)ELISA试剂盒，英文名：TREM2 ELISA Kit人单胺氧化酶(MAO)ELISA试剂盒人96T0.156-10 mIU/mL大鼠前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA试剂盒，英文名：PGDS ELISA KiISA Kit for Human Nesfatin-1大鼠类固醇5α还原酶1(SRD5A1)ELISA试剂盒，英文名：SRD5A1 ELISA Kit人N-alpha-乙酰转移酶20 ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒，英文名：AFP ELISA KiISA Kit for Human Plectin大鼠谷胱甘肽S转移酶(GSTs)ELISA试剂盒，英文名：GSTs ELISA Kit人蛋白激酶Cε(Protein kinase C epsilon type)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒，英文名：MCP-4/CCL13 ELISA Kit
羊抗人C3-纯化抗体 1mg/10mg 国产

phospho-YWHAE(Thr232) 英文名称： 磷酸化14-3-3E蛋白抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Cofilin/CFL1 (Tyr139) 磷酸化丝切蛋白抗体 规格 0.1ml

HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受体抗体(N端)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DOK5 英文名称： 胞浆接头蛋白Dok5抗体 0.2ml

Anti-4EBP1 eIF4E结合蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Anti-STAT3 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖转运蛋白2(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

孕激素诱导阻断因子抗体 Anti-PIBF 0.2ml

14-3-3 sigma 英文名称： 14-3-3σ抗体 0.2ml

EDNRA 英文名称： 内皮素受体A抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-MYL6(Tyr29+Ser30) 磷酸化肌球蛋白轻链6抗体 规格 0.1ml

GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖转运蛋白2(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。