人胚肺二倍体细胞；HEL-1培养

细胞名称  人胚肺二倍体细胞；HEL-1培养
形态特性 成纤维细胞样　

品牌 贴壁生长

特征特性 该细胞系来自一男性胎儿的正常肺组织,1986年由中国科学院昆明细胞库建立。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

传代方法 1：

2传代；3-4天一次  

传代情况 P5

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 荧光法（-）　

STR -

同工酶

染色体

使用权限 A类
人胚肺二倍体细胞；HEL-1培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Human T-box protein 3 ELISA Kit(human) 人转录因子Tbx3 ELISA试剂盒Multi-class antibodies规格： 96T

Anti-SSTR5 生长抑素受体5抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗人IgG 规格 0.3ml

Human c-jun ELISA Kit 人c-jun 96T

C9orf156 英文名称： 9号染色体开放阅读框156抗体 0.1ml

BATF 英文名称： B细胞转录激活因子抗体 0.1ml

Anti-SSTR5 生长抑素受体5抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
VEGF-B(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B) ELISA KIT 人血管内皮细胞生长因子BMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-GHR 生长激素受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG 小鼠抗豚鼠IgG 规格 1mg

HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit 人热休克蛋白糖蛋白96 96T

RAMP3 英文名称： 受体活性修饰蛋白3抗体 0.2ml

phospho-Beta catenin (Tyr86) 英文名称： 磷酸化β 连环素蛋白抗体 0.1ml

Anti-GHR 生长激素受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠低氧诱导因子2α(HIF2α)ELISA试剂盒，英文名：HIF2α ELISA KiISA Kit for Human Sodium/calcium exchanger 1大鼠内分泌腺来源血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒，英文名：EG-VEGF ELISA KiISA Kit for Human Tryptophan 5-hydroxylase 2大鼠含缬酪肽蛋白(VCP)ELISA试剂盒，英文名：VCP ELISA KiISA Kit for Human Polyubiquitin-B大鼠成纤维细胞生长因子3(FGF3)ELISA试剂盒，英文名：FGF3 ELISA Kit大鼠N-myc下游调节基因2(NDRG2)ELISA试剂盒，英文名：NDRG2 ELISA Kit豚鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)ELISA试剂盒，英文名：RANTES ELISA KiISA Kit for Human Aquaporin-9小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒，英文名：VCAM-1/CD106 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Interleukin-36 gamma小鼠白介素6(IL6)ELISA试剂盒，英文名：IL6 ELISA KiISA Kit for Human Corticotropin小鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒，英文名：β-CG ELISA KiISA Kit for Human Brain-derived neurotrophic factor小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒，英文名：TRACP-5b ELISA KiISA Kit for Human Putative ATP-dependent Clp protease proteolytic subunit, mitochondrial小鼠肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)ELISA试剂盒，英文名：L-FABP ELISA KiISA Kit for Human Chitinase-3-like protein 1小鼠白介素15(IL-15)ELISA试剂盒，英文名：IL-15 ELISA KiISA Kit for Human Protein CYR61小鼠4-羟基壬烯酸(HNE)ELISA试剂盒，英文名：HNE ELISA Kit人白介素13受体α-2（IL13RA2）ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠Smad同源物7(Smad7)ELISA试剂盒，英文名：Smad7 ELISA Kit
兔抗亲和素纯化抗体 1mg/10mg 国产

YES1 英文名称： 原癌基因酪酸蛋白激酶Yes1抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser339) 磷酸化原癌基因c-Raf抗体 规格 0.1ml

HA tag HA tag标签多肽Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DRD4 英文名称： 多巴胺受体D4抗体 0.2ml

TFRC Transferrin Receptor / TFRC / CD71 兔单抗 (PE) Human
VZV-IgG(Human Varicella zoster virus IgG) ELISA Kit 人水痘带状疱疹病毒IgGMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Kiss-1 转移抑制基因抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh LASS5 长寿相关基因lASS5抗体 规格 0.2ml

5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 人5羟色胺 96T

PAI1 英文名称： 内皮细胞纤溶酶原激活抑制蛋白1抗体 0.2ml

Cux2 英文名称： 转录同源蛋白质CUX2抗体 0.1ml

Anti-Kiss-1 转移抑制基因抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml