人胚肺二倍体细胞；2BS培养

细胞名称  人胚肺二倍体细胞；2BS培养
形态特性 成纤维细胞样

品牌 贴壁生长

特征特性 人胚肺二倍体细胞,来自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株

培养条件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清，10%；水解乳蛋白，10%  

传代方法 1：2-1：4

传代情况 P21

冻存条件 基础培养液+20%牛血清+10%DMSO

支原体检测 培养法（-）　

STR Amelogenin:X； D7S820:8,11；CSF1PO:10,12；D13S317:8,11；D16S539:9,12；D18S51:14,17；D21S11:29,30；D3S1358:15；D5S818:11；D8S1179:11,13；FGA:19,22；PentaD:11,13；PentaE:7,11；TH01:7,9；TPOX:8,10；vWA:18

同工酶 人B,NP,G7PG,MD,AST

染色体

使用权限 A类

人胚肺二倍体细胞；2BS培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Pro-ANP ELISA Kit 大鼠前心钠肽Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化ATR抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAHD2A 延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗体 规格 0.2ml

PDGF-BB(Human Plaet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生长因子BB 96T

7-Mar 英文名称： 膜相关环指蛋白7抗体 0.1ml

ABLIM3 英文名称： 肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体 0.2ml

Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化ATR抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b) 锌指脂蛋白-1b(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-SIGLEC11 唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素11抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Oncostatin M 癌基因蛋白抑瘤素M抗体 规格 0.2ml

NGF Kit Human 人 NGF / NGFB ELISA配对抗体 ELISA

T2R50 英文名称： 味觉受体蛋白家族2亚基50抗体 0.2ml

Cytochrome P450 17A1 英文名称： 细胞色素C P450 17A1抗体 0.1ml

Anti-SIGLEC11 唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素11抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
人载脂蛋白L1(Apolipoprotein L1)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒，英文名：AchE ELISA KiISA Kit for Human Laminin subunit beta-1大鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒，英文名：Free-T3 ELISA KiISA Kit for Human Molybdenum cofactor sulfurase大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA试剂盒，英文名：CYP2E1 ELISA KiISA Kit for Human Mucin-20大鼠醛固酮(ALD)ELISA试剂盒，英文名：ALD ELISA KiISA Kit for Human Oxysterols receptor LXR-alpha大鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒，英文名：Gzms-A ELISA KiISA Kit for Human 2'-5'-oligoadenylate synthase 1大鼠胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)ELISA试剂盒，英文名：CSE ELISA KiISA Kit for Human Phosphatidylinositol 3, 4, 5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 1 protein大鼠雌激素(E)ELISA试剂盒，英文名：E ELISA Kit

人花生四烯酸-15-脂加氧酶B(ALOX15B)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒，英文名：gp130 ELISA KiISA Kit for Human Podocalyxin大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA试剂盒，英文名：SDC1 ELISA KiISA Kit for Human Eosinophil cationic protein大鼠阻抑素(PHB)ELISA试剂盒，英文名：PHB ELISA KiISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-1大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA试剂盒，英文名：PAI1 ELISA KiISA Kit for Human Serpin A12大鼠羟烷基辅酶A脱氢酶β(HADHβ)ELISA试剂盒，英文名：HADHβ ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4大鼠基质金属蛋白酶12(MMP12)ELISA试剂盒，英文名：MMP12 ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8大鼠碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅲ(DIO3)ELISA试剂盒，英文名：DIO3 ELISA Kit
羊抗小鼠IgG-纯化抗体 1mg/10mg 国产

XDH 英文名称： 氧化酶抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致癌基因C-Myc抗体 规格 0.1ml

HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人类疱疹病毒8抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Dynamin 3 英文名称： 酶动力蛋白3抗体 0.1ml

Anti-phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信号识别颗粒抗体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-IGFBP3 胰岛素样生长因子结合蛋白3抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAL/MPV17 T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体 规格 0.2ml

1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羟基维生素D3 96T

RNF39 英文名称： 环指蛋白39抗体 0.2ml

CNPase 英文名称： C型钠尿肽抗体 0.1ml

Anti-IGFBP3 胰岛素样生长因子结合蛋白3抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml