详细介绍
人乳腺上皮细胞;MCF-10A价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人乳腺上皮细胞;MCF-10A价格
形态特性 上皮样
品牌 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 5%HS + 10ug/ml insulin + 20ng/ml EGF + 100ng/ml 霍乱毒素 + 0.5ug/ml 氢化松
传代方法
传代情况
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D12S391:17,20;D13S317:8,9;S16S539:11,12;D18S51:18,19;D19S433:13,15;D21S11:28,30;D2S1338:21,26;D3S1358:14,18;D5S818:10,13;D6S1043:12,18;D7S820:10,11;D8S1179:14,16;FGA:22,24;Penta E:13,14;TH01:8,9.3;TPOX:9,11;vWA:15,17;
同工酶
染色体
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT 小鼠碳酸酐酶2Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CD31(PECAM-1)/PE 荧光素PE标记血小板内皮细胞黏附分子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DVL1 蓬乱蛋白1抗体 规格 0.1ml
Rotavirus IgG 轮状病毒 IgG(间接法二步法)
6-Mar 英文名称: 膜相关环指蛋白6抗体 0.2ml
Anti-CD31(PECAM-1)/PE 荧光素PE标记血小板内皮细胞黏附分子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- N-terminal (1a) 锌指脂蛋白-1a(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-Sialic14 唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素14抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh OPCML 样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体 规格 0.1ml
XPNPEP2 Kit Human 人 XPNPEP2 ELISA配对抗体 ELISA
TWSG1 英文名称: 扭转原肠胚形成同源蛋白1抗体 0.2ml
CLDND1 英文名称: 膜蛋白CLDND1抗体 0.1ml
NcoI规格:1000 units
NdeI规格:500 units
NdeI规格:2500 units
NdeI规格:4000 units
NotI规格:300 units
NotI规格:1500 units
NotI, HC规格:1500 units
NotI规格:500 units
PaeI (SphI)规格:500 units
PaeI (SphI)规格:2500 units
PstI规格:3000 units
PstI规格:5x3000 units
PstI规格:10000 units
PvuI规格:300 units
PvuI规格:1500 units
PvuII规格:2500 units
PvuII, HC规格:12500 units
PvuII规格:5000 units
SalI规格:1500 units
SalI规格:5x1500 units
SalI规格:2000 units
SduI (Bsp1286I)规格:500 units
SmaI规格:1200 units
SmaI规格:5x1200 units
SmaI, HC规格:6000 units
Dlx5 英文名称: 同源转录因子DLX5抗体 0.2ml
Anti-5-HTR3 5-羟色胺受体3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-Btk(Ser180) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠蛋白激酶ATK抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-ED-1/FITC 荧光素标记外胚层发育不良抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CTBP1 C端结合蛋白1抗体 规格 0.2ml
/BSA 与血清白蛋白偶联物 2mg
KGF 英文名称: 纤维母细胞生长因子7抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh VEGFR1/FLT1 血管内皮生长因子受体1抗体 规格 0.1ml
Anti-ED-1/FITC 荧光素标记外胚层发育不良抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml