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人永生化表皮细胞;HaCaT培养

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具体成交价以合同协议为准
  • 型号
  • 品牌 ATCC
  • 厂商性质 经销商
  • 所在地 上海市

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更新时间:2025-03-27 13:45:36浏览次数:370

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

应用领域 化工    
人永生化表皮细胞;HaCaT培养只能用于科研,不得用于临床。应用公司细胞库细胞株种类齐全:大鼠腹水癌细胞、肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株。细胞状态良好,饱满,光泽度好,*,专业技术指导。欢迎广大科研用户!

详细介绍

细胞名称  人永生化表皮细胞;HaCaT培养
形态特性 上皮细胞样

品牌 贴壁生长

特征特性 该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。

培养条件 MEM-EBSS:

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 15%FBS  

传代方法 1:10~1:20传代,每周换液2~3次

传代情况 C2

冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法(-) 

STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,11;D13S317:10,12;D16S539:9,12;D18S51:12;D19S433:13,14;D21S11:30.2;D2S1338:17,25;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:11,12;vWA:16,17,OL;

同工酶

染色体 72~88

使用权限 A类

人永生化表皮细胞;HaCaT培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线

NcoI规格:1000 units

NdeI规格:500 units

NdeI规格:2500 units

NdeI规格:4000 units

NotI规格:300 units

NotI规格:1500 units

NotI, HC规格:1500 units

NotI规格:500 units

PaeI (SphI)规格:500 units

PaeI (SphI)规格:2500 units

PstI规格:3000 units

PstI规格:5x3000 units

PstI规格:10000 units

PvuI规格:300 units

PvuI规格:1500 units

PvuII规格:2500 units

PvuII, HC规格:12500 units

PvuII规格:5000 units

SalI规格:1500 units

SalI规格:5x1500 units

SalI规格:2000 units

SduI (Bsp1286I)规格:500 units

SmaI规格:1200 units

SmaI规格:5x1200 units

SmaI, HC规格:6000 units


MASP2 英文名称: 甘露聚糖结合凝集素丝酸肽酶2抗体 0.1ml

phospho-AMPK alpha-1 (Thr172) 英文名称: 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 0.1ml

Anti-Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。


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