人胚胎心肌组织来源细胞；CCC-HEH-2培养

细胞名称  人胚胎心肌组织来源细胞；CCC-HEH-2培养
形态特性

品牌 贴壁生长　

特征特性 取材自引产的11周男性胚胎组织，该细胞由中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS  

传代方法 1：

3传代；3~4天1次。  

传代情况 P4

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 培养法（-）　

STR 　

同工酶

染色体 　

使用权限 A类
人胚胎心肌组织来源细胞；CCC-HEH-2培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
VLA ELISA Kit 大鼠迟现抗原Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猴磷酸化活化复制因子2(phospho ATF 2)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FADS1 脂肪酸去饱和酶1抗体 规格 0.2ml

KGF(Human Keratinocyte Growth Factor) ELISA Kit 人角化细胞生长因子 96T

2-Mar 英文名称： 膜相关环指蛋白2抗体 0.2ml

ATM 英文名称： 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 0.1ml

Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、猴磷酸化活化复制因子2(phospho ATF 2)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
大鼠抗IVIgG抗体ELISA Kit 大鼠抗IVIgG抗体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-ZNF268 锌指脂蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh FTO/Protein fatso 脂肪堆积和肥胖相关蛋白抗体 规格 0.2ml

IGFBP2(Human insulin-like growth factors binding protein 2) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子结合蛋白2 96T

Nidogen 2 英文名称： 巢蛋白NID2抗体 0.2ml

APOBEC3B 英文名称： 载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B抗体 0.2ml

Anti-ZNF268 锌指脂蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
人组织内转化生长因子β结合蛋白4(LTBP4)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠整合素α2(ITGA2)ELISA试剂盒，英文名：ITGA2 ELISA Kit人3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠谷丙转氨酶(ALT)ELISA试剂盒，英文名：ALT ELISA Kit人白介素-37(Interleukin-37)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠补体成分5a受体1(C5aR1)ELISA试剂盒，英文名：C5aR1 ELISA Kit人免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠Persephin蛋白(PSPN)ELISA试剂盒，英文名：PSPN ELISA Kit人激肽释放酶6(KLK-6)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠轴突生长诱向因子1(Ntn1)ELISA试剂盒，英文名：Ntn1 ELISA Kit人溶血磷脂酸受体4(LPAR4)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠血管生长素(ANG)ELISA试剂盒，英文名：ANG ELISA Kit人髓性细胞核分化抗原(MNDA)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒，英文名：AQP-1 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Low-density lipoprotein receptor大鼠血清素(5-羟色胺)-N-乙酰基转移酶(AANAT)ELISA试剂盒，英文名：AANAT ELISA Kit人同源异形盒蛋白NANOG(Homeobox protein NANOG)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒，英文名：IgG ELISA Kit人的神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒，英文名：MMP-5 ELISA Kit人脑啡肽原B(Proenkephalin-B)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒，英文名：CA ELISA Kit人前阿片黑素细胞皮质激素(POMC)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒，英文名：IL-13 ELISA Kit人Ras相关蛋白(RAB14) ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠5羟二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA试剂盒，英文名：5-HETE ELISA Kit人斯钙素2(STC-2)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠血幼素(HJV)ELISA试剂盒，英文名：HJV ELISA Kit
杂交袋(15×25cm) 100张/包 国产

ZFYVE27 英文名称： 锌指FYVE结构域蛋白27抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Ser154) 磷酸化DNA甲基转移酶1抗体 规格 0.1ml

FoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T细胞转录因子)抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DIAPH2 英文名称： DIAPH2蛋白抗体 0.2ml

CCNA1 Cyclin A1 / CCNA1 鼠单抗 (PE) Human
bFGF-6(Human basic fibroblast growth factor 6) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子6Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-GRP78 葡萄糖调节蛋白78抗体(热休克蛋白70蛋白5)Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MMP-8 基质金属蛋白酶-8抗体 规格 0.1ml

(MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基质金属蛋白酶7 96T

phospho-RASA1 (Tyr460) 英文名称： 磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大综合征相关蛋白抗体 0.1ml

CRYZL1 英文名称： 醌氧化还原酶样蛋白1抗体 0.2ml

Anti-GRP78 葡萄糖调节蛋白78抗体(热休克蛋白70蛋白5)Multi-class antibodies规格： 0.1ml