详细介绍
细胞名称 人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2品牌
形态特性
品牌 贴壁生长
特征特性 取材自引产的11周男性胚胎组织,该细胞由中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。
培养条件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
传代方法 1:
3传代;3~4天1次。
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2品牌贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
CT ELISA Kit 大鼠降钙素Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-ATF3/FITC 荧光素标记活化转录因子3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FADD Fas死亡结构域相关蛋白 规格 0.1ml
CDT ELISA Kit 大鼠糖缺失性转铁蛋白 96T
1-Mar 英文名称: 膜相关环指蛋白1抗体 0.2ml
alpha 1 Fetoprotein 英文名称: 甲胎蛋白抗体 0.1ml
Anti-ATF3/FITC 荧光素标记活化转录因子3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA Kit 大鼠胃肠癌标志物CA199Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-BNP/Biotin 生物素化脑钠肽抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FRG2B FRG2B蛋白抗体 规格 0.2ml
IL-16(Human Interleukin 16) ELISA KIT 人白介素16 96T
Neurogenin 3 英文名称: 神经元素3抗体 0.1ml
ABP1 英文名称: 植物生长激素ABP1抗体 1ml
Anti-BNP/Biotin 生物素化脑钠肽抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
豚鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒,英文名:SAA ELISA KiISA Kit for Human V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1大鼠表皮生长因子受体2(EGFR2)ELISA试剂盒,英文名:EGFR2 ELISA Kit大鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA试剂盒,英文名:APLN ELISA KiISA Kit for Human Copper-transporting ATPase 1小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒,英文名:TNFsR-Ⅱ ELISA KiISA Kit for Human Advanced glycosylation end product-specific receptor小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒,英文名:Cyclin-D1 ELISA KiISA Kit for Human Vasopressin-neurophysin 2-copeptin小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒,英文名:ODF ELISA KiISA Kit for cholyglycine小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒,英文名:Collagenase II ELISA Kit
ELISA Kit for Human Apolipoprotein L1小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒,英文名:AChRab ELISA KiISA Kit for Human C-C chemokine receptor type 5小鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒,英文名:Resistin ELISA KiISA Kit for Human Cytosolic non-specific dipeptidase小鼠β-防御素1(β-BD-1)ELISA试剂盒,英文名:β-BD-1 ELISA KiISA Kit for Human Cathepsin K小鼠生长调节致基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒,英文名:GROα/CXCL1/MGSA ELISA KiISA Kit for Human Beta-defensin 129小鼠载脂蛋白A2(APOA2)ELISA试剂盒,英文名:APOA2 ELISA KiISA Kit for Human Electron transfer flavoprotein-ubiquinone oxidoreductase, mitochondrial小鼠脱氧吡啶酚(DPD)ELISA试剂盒,英文名:DPD ELISA KiISA Kit for Human Fascin-2小鼠前动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒,英文名:PK2 ELISA Kit
终止液 12ml 进口分装
VIP Receptor 1 英文名称: 血管活性肠肽受体-1抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin (Ser675) 磷酸化β 连环素蛋白抗体 规格 0.1ml
MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 基质金属蛋白酶-26抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DARC 英文名称: Duffy血型趋化因子受体抗体 0.2ml
Anti-AT2R 血管紧张素Ⅱ受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Hp-IgG(Mouse Helicobacter pylori IgG) ELISA Kit 小鼠幽门螺旋菌IgGMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎症蛋白-1γ抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EFR3A EFR3A蛋白抗体 规格 0.2ml
(IL-2sR)ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受体 96T
Munc13 英文名称: 神经突触前膜胞内蛋白13抗体 0.1ml
ATP6V0D2 英文名称: ATP6V0D2蛋白抗体 0.2ml
Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎症蛋白-1γ抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。