人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2培养

细胞名称  人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2培养
形态特性 上皮样

生长特性 贴壁生长　

特征特性 取材自引产的11周男性胚胎组织，由中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS  

传代方法 1：

3传代；3~4天1次。  

传代情况 P5

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 培养法（-）　

STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：9，11；D16S539：11，13；D18S51：12，13；D19S433：13，14；D21S11：29；D2S1338：17，23；D3S1358：16；D5S818：9，11；D7S820：10，12；D8S1179：10，13；FGA：21，25；TH01：7，9；TPOX：8，11；vWA：14，16；

同工酶

染色体 　

使用权限 A类
人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-2,4-D 2，4-二氯苯氧乙酸(除草剂)单克隆抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Connexin 43(Ser368) 磷酸化Connexin 43蛋白抗体 规格 0.1ml

羊抗人纤维蛋白原纯化抗体 1mg/10mg 国产

14-3-3 epsilon 英文名称： 14-3-3E蛋白抗体 0.2ml

DCAF12 英文名称： 癌中心体相关蛋白抗体 0.2ml

Anti-2,4-D 2，4-二氯苯氧乙酸(除草剂)单克隆抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
化合物与血清白蛋白BSA偶联抗原 化合物与鸡卵蛋白OVA偶联抗原Multi-class antibodies规格： 与血蓝蛋白KLH偶联抗原

Anti-CDK4 周期素依赖性激酶4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh OLFM1 嗅球蛋白1抗体 规格 0.2ml

TNFRSF1B Kit Mouse 小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B ELISA配对抗体 ELISA

TSLP 英文名称： 胸腺基质淋巴细胞生成素-1抗体 0.1ml

Cyclophilin B 英文名称： 亲环蛋白(亲环素)PPIB抗体 0.2ml

Anti-CDK4 周期素依赖性激酶4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
豚鼠一氧化氮(NO)ELISA试剂盒，英文名：NO ELISA Kit大鼠阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1α(SCNN1α)ELISA试剂盒，英文名：SCNN1α ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒，英文名：IgA ELISA KiISA Kit for Human Argininosuccinate synthase小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒，英文名：IGFBP-1 ELISA KiISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17小鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒，英文名：MPO ELISA KiISA Kit for Human Myc box-dependent-interacting protein 1小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒，英文名：PI3K ELISA KiISA Kit for Human NADH-cytochrome b5 reductase 2小鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)ELISA试剂盒，英文名：Nrf2 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Apolipoprotein A-I-binding protein小鼠乙酰胆碱转移酶(CHAT)ELISA试剂盒，英文名：CHAT ELISA KiISA Kit for Human C-C chemokine receptor type 7小鼠表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒，英文名：EGFR ELISA KiISA Kit for Human Carbonic anhydrase 2小鼠E3泛素蛋白连接酶TRIM68(TRIM68)ELISA试剂盒，英文名：TRIM68 ELISA KiISA Kit for Deoxypyridinoline小鼠10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP-10)ELISA试剂盒，英文名：IP-10 ELISA KiISA Kit for Endotoxin小鼠血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)ELISA试剂盒，英文名：VEGFR1 ELISA KiISA Kit for Human Fibroblast growth factor 8小鼠肾足蛋白(NPHN)ELISA试剂盒，英文名：NPHN ELISA Kit人双重特异性促分裂原活化蛋白激酶激酶1(MAP kinase kinase 1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA试剂盒，英文名：CTLA-4/CD152 ELISA Kit
猪IgG干粉 10mg/50mg/100mg 国产

WFDC5 英文名称： P53应答基因蛋白5抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-CDK9 (Thr29) 磷酸化周期素依赖性激酶9抗体 规格 0.1ml

IL-17(Interleukin-17) 白介素-17抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DLG5 英文名称： 胎盘和前列腺相关蛋白DLG5抗体 0.1ml

Anti-ACTH (1-39) 促肾上腺皮质激素(1-39)抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
CR(Mouse Calretinin) ELISA Kit 小鼠钙结合蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-CCL13/MCP-4/FITC 荧光素标记单核细胞趋化蛋白4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh EFHC1 EFHC1蛋白抗体 规格 0.2ml

(EGFR)ELISA Kit 大鼠表皮生长因子受体 96T

MAdCAM1 英文名称： 粘膜细胞粘附分子1抗体 0.1ml

phospho-ATM (Ser794) 英文名称： 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 0.1ml

Anti-CCL13/MCP-4/FITC 荧光素标记单核细胞趋化蛋白4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml