人胚肺成纤维细胞；CCC-HPF-1培养

细胞名称  人胚肺成纤维细胞；CCC-HPF-1培养
形态特性 成纤维细胞样　

生长特性 贴壁生长　

特征特性 取材自引产的15周胚胎组织，中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。

培养条件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

传代方法 1：

3传代；3~4天1次。  

传代情况 P9

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 培养法（-）　

STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：12；D18S51：13,20；D19S433：14.2,16.2；D21S11：29,32.2；D2S1338：19,20；D3S1358：14,15；D5S818：12,13；D7S820：10；D8S1179：13,14；FGA：21，23；TH01：7，9；TPOX：9,10；vWA：16；　

同工酶

染色体 46,XY

使用权限 A类
人胚肺成纤维细胞；CCC-HPF-1培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
ANG-2 ELISA Kit 大鼠血管生成素2Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-AR/FITC 荧光素标记雄激素受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM161B FAM161B蛋白抗体 规格 0.2ml

AIF ELISA Kit 大鼠凋亡诱导因子 96T

(2F11) 英文名称： 单克隆抗体 0.1ml

phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260) 英文名称： 磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体 0.1ml

Anti-AR/FITC 荧光素标记雄激素受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
重组K3蛋白 重组K3蛋白Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-IL-2R gamma/CD132 白介素2受体γ链抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAK2 p21激活激酶2抗体 规格 0.1ml

ACRV1 Kit Human 人 ACRV1 ELISA配对抗体 ELISA

TSPAN3 英文名称： 四分子交联体3抗体(四旋蛋白) 0.2ml

CNTNAP4 英文名称： 接触蛋白相关蛋白4抗体 0.1ml

Anti-IL-2R gamma/CD132 白介素2受体γ链抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
脂氧素B4(Lipoxin B4)ELISA试剂盒通用96T1.56-100 ng/mL大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA试剂盒，英文名：TNF-γ ELISA KiISA Kit for Human C-C chemokine receptor type 1小鼠白介素35(IL-35)ELISA试剂盒，英文名：IL-35 ELISA KiISA Kit for Human C-opeptide of Collagen alpha-1(I) chain小鼠B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA试剂盒，英文名：Bcl-xl ELISA KiISA Kit for Human Dimethylglycine dehydrogenase, mitochondrial小鼠棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)ELISA试剂盒，英文名：MPP6 ELISA KiISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1小鼠硝基(NT)ELISA试剂盒，英文名：NT ELISA KiISA Kit for Human Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A小鼠上皮性钙黏附蛋白(CDHE)ELISA试剂盒，英文名：CDHE ELISA KiISA Kit for Human Gremlin-1小鼠醌NADH脱氢酶1(NQO1)ELISA试剂盒，英文名：NQO1 ELISA Kit

人胃脂肪酶(LIPF)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒，英文名：aGT 英文名：GS ELISA KiISA Kit for Human Interferon-induced transmembrane protein 3小鼠补体成分4b(C4b)ELISA试剂盒，英文名：C4b ELISA KiISA Kit for Human Immunoglobulin A小鼠N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)ELISA试剂盒，英文名：NAGα ELISA KiISA Kit for Human Kallikrein-2大鼠肿瘤转移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)ELISA试剂盒，英文名：KISS1/Kisspeptin 1 ELISA KiISA Kit for Human Leukemia inhibitory factor receptor大鼠血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA试剂盒，英文名：ANG-R-Tie1 ELISA KiISA Kit for Human Max dimerization protein 1大鼠瘦素(Leptin)ELISA试剂盒，英文名：Leptin ELISA Kit
总RNA抽提试剂 100ml 国产

ZA20D3 英文名称： 锌指蛋白20D3抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser142) 磷酸化CREB-1抗体 规格 0.1ml

phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DLX2 英文名称： 同源转录因子DLX2抗体 0.2ml

SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔单抗 (PE) Mouse
Apo-H(Mouse Apolipoprotein H) ELISA Kit 小鼠载脂蛋白HMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-CASP4/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ELOVL2 长链脂肪酸延长酶ELOVL2抗体 规格 0.2ml

(ADAM9)ELISA Kit 大鼠解整合素样金属蛋白酶9 96T

Myozenin 1 英文名称： MYOZ抗体 0.2ml

phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305) 英文名称： 磷酸化蛋白激酶B抗体 0.1ml

Anti-CASP4/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。