人胚肾细胞；293 HEK-293培养

细胞名称  人胚肾细胞；293 [HEK-293]培养
形态特性   上皮样
生长特性  贴壁生长　
特征特性   早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5（Ad5）基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1～4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS　
传代方法   1:10~1:20传代，每2~3天换液1次。
传代情况  P20
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS　
支原体检测  培养法（-）　
STR   Amelogenin：X；CSF1PO：7，12；D13S317：12；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：15，18；D21S11：28，30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，17；D5S818：8，9；D7S820：11；D8S1179：12，14；FGA：23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，19；
同工酶  
染色体   　
使用权限  A类
人胚肾细胞；293 [HEK-293]培养操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
人胚肾细胞；293 [HEK-293]培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
人胚肾细胞；293 [HEK-293]培养悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。

Hin6I (HinP1I)规格：2000 units

HincII (HindII)规格：500 units

HincII (HindII)规格：2500 units

HindIII规格：5000 units

HindIII规格：5x5000 units

HindIII, HC规格：25000 units

HindIII规格：10000 units

HpaII规格：1000 units

HpaII规格：5000 units

KpnI规格：4000 units

KpnI规格：5x4000 units

KpnI, HC规格：20000 units

Kpn2I (BspEI)规格：500 units

Kpn2I (BspEI)规格：2500 units

MspI (HpaII)规格：3000 units

MspI (HpaII)规格：5x3000 units

MvaI (BstNI)规格：2000 units

MluI规格：1000 units

MluI规格：5000 units

NcoI规格：500 units

NcoI规格：2500 units

NcoI规格：1000 units

NdeI规格：500 units

NdeI规格：2500 units

非冻型尿液DNA保存液
非冻型尿液DNA保存液
非冻型拭子DNA保存液（A型）
非冻型拭子DNA保存液（B型）
非冻型血液DNA保存液（100 mL）
非冻型血液DNA保存液（250 mL）
非冻型组织DNA保存液（100 mL）
红细胞裂解液A型（核酸纯化）
红细胞裂解液B型（流式细胞分析用）
菌体内毒素清除剂
土壤腐殖酸清除剂
人胚肾细胞；293 [HEK-293]培养一步离心式石蜡清除剂
动物DNA提取
96孔板血液DNAout(真空法)（见关联产品）
96孔板血液DNAout（离心法）（1次）
96孔板血液DNAout（离心法）（5次）
FTA血片DNAout（见关联产品）