原代细胞酶消化法是比较常用的纯化方法，不仅对贴壁细胞可行，能利用上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同，使两者分开，达到纯化的目的，对贴壁细胞与半贴壁及粘附细胞间的分离纯化也是十分有效的。

(1)上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化
两者在胰蛋白酶的作用下，由于成纤维细胞先脱壁，而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁，特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显，故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开，方法如下：
①采用常规消化传代方式 将0.25%胰蛋白酶注入培养瓶内两次，每次加1mL(25mL培养瓶)来回轻摇1-2次，使胰蛋白酶流过所有细胞表面，然后倒掉。
②盖好瓶塞(或盖)，将培养瓶放在倒置显微镜下观察，发现纤维样细胞变圆，部分脱落，立即加入2mL有血清的培养液终止消化。
③ 用弯头吸管轻轻吹打纤维样细胞生长的区域(可事先在镜下用记号笔在培养瓶上划出记号)。吹打时不要用力，也不要吹打上皮细胞生长区域。吹打结束后，再用少 量培养液漂洗一遍，然后加入适量培养液于瓶内继续培养，也可重复上述操作再进行一次，隔几日后或下次传代时，再进行上述操作，经过几次处理，就可将成纤维 细胞去除或将两者分开。
(2)骨髓基质肌样细胞的纯化
在血液细胞和骨髓细胞静置培养时，常有许多肌样细胞和骨髓基质细胞贴壁生长，但也有 许多淋巴细胞、单核细胞、粒细胞粘附其上，种类混杂，鉴于粘附细胞贴壁不牢固，也可用酶消化法使粘附细胞脱壁分离，以达到骨髓基质细胞或血液中肌样细胞与 淋巴细胞分开和纯化的目的。其方法如下：
①待基质或肌样细胞基本形成单层时，倒去旧液，加入无钙、镁PBS漂洗，并用力摇动后倒掉，反复洗2~3次后，一方面可洗去血清和钙镁离子以助酶消化，另一方面又可使大部分粘附细胞被洗掉，但仍留有不少粘附细胞。
②将0.25%胰蛋白酶注入培养瓶内，每瓶1mL(25mL培养瓶)，轻轻摇动让胰蛋白酶流过细胞表面，作用1~2分钟后再轻轻摇动1~2次后倒去。
③盖好瓶盖，在普通显微镜下观察，发现基质或肌样细胞由于贴壁较牢固未脱壁，而原先粘附的细胞已浮起，此时再加2mL PBS洗一次倒掉，尽量除去粘附细胞。
④加入含血清的培养基终止消化，再继续用力摇动后倒掉，加入培养基继续培养。隔几日或下次传代前，再进行上述操作，经过几次处理和传代培养后就可将粘附原代细胞去除，将两者分开，达到使骨髓基质细胞或肌样细胞纯化的目的。

2592-95-2 1-羟基-苯并三氮唑(无水) (HOBt)（ 2-8℃） 英文名称： CAS号： 1-Hydroxybenzotriazole

123333-53-9 1-羟基苯并三唑一水 英文名称： CAS号： 1-Hydroxybenzotriazole hydrate

5315-79-7 1-羟基芘 英文名称： CAS号： 1-HYDROXYPYRENE

23074-42-2 1-氰基金刚烷 英文名称： CAS号： 1-Adamantanecarbonitrile

143-08-8 1-壬醇;第九醇;辛基甲醇 英文名称： CAS号： 1-Nonanol;Octyl carbinol;Pelargonic alcohol;Nonalol;Alcohol C-9

18156-74-6 1-*基硅咪唑 英文名称： CAS号： N-(Trimethylsilyl)imidazole

112-55-0 1-十二硫醇 英文名称： CAS号： 1-Dodecanethiol
原代细胞