详细介绍
末端转移酶CAS号:9027-67-2产品详情:
末端转移酶
英文名称:TDT;Terminal Transferase;Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
其他名称:末端脱氧核苷酸转移酶;胸腺五肽
CAS号:9027-67-2
分子量:60000
级别:BR
来源:大肠杆菌细胞,含有编码牛胸腺末端脱氧核苷转移酶的基因
浓度:20u/ul
活性定义:是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物:66mM二甲胂酸钾(PH7.2),1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP
保存液组分:100mM 醋酸钾(PH6.8)、2mM β-巯基乙醇,0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油
5×反应缓冲液:1M 二甲胂酸钾、125mM Tris,0.05%(v/v) Triton X-100,5mM CoCL2(PH7.2,25℃)
抑制剂:金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子
失活:加入EDTA,70℃加热10分钟
质量保证:测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
注意:由于含有CoCL2,TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容,需采用柱离心法或苯酚/氯方抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物,除去CoCL2
性状(以下信息仅供参考):悬浮液,重组酶。末端转移酶(Terminal transferase, TdT)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是:先在载体上打开一单个位点,把它与末端转移酶和某一dNTP(如dATP)一起保温以使添尾,另一待插入的外源DN片段则用互补的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DN片段彼此退火,使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受全菌所修复。
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)催化DNA的3'末端添加同聚物;DNA的3'末端标记
保存:-20°C
末端转移酶CAS号:9027-67-2 公司主营:elisa试剂盒、ATCC细胞、微生物菌种、各种生化试剂、分子生物学、抗体、血清、荧光试剂盒等等。客户可向我们咨询您所需的产品、数量,我们诚挚希望能与您合作。
稳定性判断原则:
1.无机化合物,只要妥善保管,包装完好无损,可以长期使用。但是,那些容易氧化、容易潮解的物质,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。
2.有机小分子量化合物一般挥发性较强,包装的密闭性要好,可以长时间保存。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。
3.有机高分子,尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料,极易受到微生物、温度、光照的影响,而失去活性,或变质,故此,要冷藏(冻)保存,而且时间也较短。
4.基准物质、标准物质和高纯物质,原则上要严格按照保存规定来保存,确保包装完好无损,避免受到化学环境的影响,而且保存时间不宜过长。一般情况下,基准物质必须在有效期内使用。
试剂提纯方法:
①蒸馏。对于易挥发的试剂,如常用的无机酸,有机溶剂等是最常用的提纯方法。根据沸点的高低选用常压或减压蒸馏法。
②升华。对于某些易升华的试剂,如碘、萘等,此法最简便。
③重结晶。适用于大多数固体试剂的提纯,其关键是选择好合适的溶剂。
④溶剂萃取。无论将母体或杂质萃取到有机溶剂相中,均可达到提纯的目的。
⑤离子交换色谱分离。是一种新型的高效提纯方法,例如,用阴离子交换树脂吸附清除盐酸中的铁(FeCl4-)。此外,还有薄层层析、电渗析、区域熔融、离子交换膜等特殊手段来分离提纯化学试剂。
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