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公司主营:elisa试剂盒、ATCC细胞、微生物菌种、各种生化试剂、分子生物学、抗体、血清、荧光试剂盒等等。客户可向我们咨询您所需的产品、数量,我们诚挚希望能与您合作。
T4 DNA连接酶产品详情:
T4 DNA连接酶
英文名称:T4 DNA Ligase
CAS号:9015-85-4
分子量:55.3kDa,单体
级别:BR
来源:含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
活性定义:是指在ATP-PPi交换反应中,37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量(weiss单位,1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位:20ul反应体系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量)
抑制剂:当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时,可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意:T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率,为避免此现象,电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下:样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存;转化时,连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%;电转化之前,先用氯方抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase,然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测:粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状(以下信息仅供参考):液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性
保存: -20°C
T4 DNA连接酶稳定性判断原则:
1.无机化合物,只要妥善保管,包装完好无损,可以长期使用。但是,那些容易氧化、容易潮解的物质,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。
2.有机小分子量化合物一般挥发性较强,包装的密闭性要好,可以长时间保存。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。
3.有机高分子,尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料,极易受到微生物、温度、光照的影响,而失去活性,或变质,故此,要冷藏(冻)保存,而且时间也较短。
4.基准物质、标准物质和高纯物质,原则上要严格按照保存规定来保存,确保包装完好无损,避免受到化学环境的影响,而且保存时间不宜过长。一般情况下,基准物质必须在有效期内使用。
试剂提纯方法:
①蒸馏。对于易挥发的试剂,如常用的无机酸,有机溶剂等是最常用的提纯方法。根据沸点的高低选用常压或减压蒸馏法。
②升华。对于某些易升华的试剂,如碘、萘等,此法最简便。
③重结晶。适用于大多数固体试剂的提纯,其关键是选择好合适的溶剂。
④溶剂萃取。无论将母体或杂质萃取到有机溶剂相中,均可达到提纯的目的。
⑤离子交换色谱分离。是一种新型的高效提纯方法,例如,用阴离子交换树脂吸附清除盐酸中的铁(FeCl4-)。此外,还有薄层层析、电渗析、区域熔融、离子交换膜等特殊手段来分离提纯化学试剂。
我们还提供:
L-ProlinolL-(+)-羟甲基吡咯烷1克BR,98%
99-64-94-二甲基本3-(Dimetxylamino)benzoic acid
CCDA基础shēng huà shì jì容量:500毫升
对盐酸盐 p-Tolylhydr hydrochloride,≥98.0% 637-60-5 5G 通用试剂
酸钠 Sodium chlorate,ACS reagent (≥99.0%) 7775-9-9 100G 通用试剂
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305-53-3乙酸钠;醋酸钠wo7ium iodoacetate
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镓(III)水合物 Gallium nitrate hydrate,≥99.999% 69365-72-6 1G 多肽试剂
正辛酸1克
微量可调移液器P1000 支 Gilson原装
OCTYL-THIOGLUCOSIDE辛基-β-D-硫代葡萄糖苷超纯级白色固体FRZsigma
聚烯亚安 50% in water POLYqTHYLqNqIMINq, BRcNCHqD 900-98-6
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