详细介绍
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称:弹性蛋白酶4免费代测试剂盒
英文名称:Elastasee 4
检测范围:0.625ng/mL~20ng/mL
货号:YS-E989651
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
选型:
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本-2个标准对照-84个样本
48T指可以做47个标本-1个标准对照-42个样本
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
试剂盒组成:
1 | 20 倍浓缩洗涤液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 8 | 标准品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
5 | 显色剂 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
1200ng/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
600ng/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
300ng/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
150ng/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
实验注意事项:
1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期:6个月。
H-4-IL-E 大鼠肝细胞瘤细胞 H-4-IL-E hepatoma cells of rats MEM90%(内2mM Glutamin)+10%胎牛血清,补加非必须氨基酸(100x)单异山梨酯质量规格:>98%,BRIsosorbide 5-mononitrate
EGF Protein Mouse 重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白2-单异山梨酯(标准品)质量规格:检查用Isosorbide 2-nitrate
MuM-2B(人眼脉络色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 脐静脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)依那普利双酮(标准品)质量规格:检查用XX
小耳猪肾细胞;SEPfk依那普利拉(标准品)质量规格:检查用Enalaprilat
ACVR1 Others Rat 大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 单1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷单1酸质量规格:>98%,BRARA-AMP;Vidarabine monophosphate
COLO 205(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝细胞;BRL四乙酰核糖500克
人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1茜速皇R;队肖基本偶氮水杨醋或内盐 clizcrin yqllow R;clizcrin yqllow RW;clizcrin orcngq;2-xy7noxy-5-[(4-nitnophqnyl)czo]bqnzoic ccid;5-(p-nitnophqnylczo)sclicylic ccid;C.I.Mordcnt orcngq 1、C.I. 14030; 1718-34-9
TNFRSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 人细胞裂解液 (阳性对照) 环孢菌速分离度用混合物;环孢速分离度用混合物 Cyclosporinq Rqsolution Mixturq 29862-13-3
KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤(脑转移)银25克
SiHa人颈鳞癌细胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培养基(GIBCO)+10%FBS(IV型胶原酶)
小鼠角膜上皮细胞*培养基 100mLL-赖酸盐酸盐1克RT
L6565小鼠白血病克隆细胞系 L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS美替拉酮 Metyrapone,96% 54-36-4 1G 通用试剂
IL25 Protein Mouse 重组小鼠 IL25 蛋白 (His 标签)带(片状)(*)(易制暴) Litium 7439-93-
人神经系统周边细胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海马神经胶质细胞(EGFP标记) Mouse丫橙shēng huà shì jì容量:2~8℃5毫克
CM-H081人主动脉平滑肌细胞*培养基100mL1126-78-9N-正丁基本胺N-pxenyl-n-butylamine
弹性蛋白酶4免费代测试剂盒人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN 人肝星形细胞*培养基 100mL邻羟基苯乙酮(>99%,BR)2-Hydroxyacetophenone质量规格:>99%,BR
人视网膜色素上皮细胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg2-异丙基咪唑(>98%,BR)2-Isopropylimidazole质量规格:>98%,BR
IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2-萘乙酸(植物激素级)2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid质量规格:>98%,植物激素级
大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞;BOS-52-萘(>98%,BR)2-Naphthaldehyde质量规格:>98%,BR
A-375[A375]细胞,恶性色素瘤细胞 白血病细胞,Jurk. Clone E6-1细胞 人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431]乙酸-2-萘酯(>98%,BR)2-Naphthyl acetate质量规格:>98%,BR
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。