详细介绍
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
产品仅用于科研储存条件:
14℃或-20℃
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 转基因品系棉花T304-40染料法qPCR试剂盒 |
英文名称 | QPCR of transgenic cotton strain t304-40 by dye method |
货号 | YSP96684 |
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份反应五要素:
产品仅用于科研参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
Goat Antirabbit IgG/Cy7 Cy7标记的羊抗兔IgG 现货供应 0.1mlBetaAmyloid (3135
Goat Antirabbit IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗兔IgG 现货供应 0.1mlBetaAmyloid 142 CT β淀粉样肽 142 (C端多肽
Goat Antirabbit IgG/PECY5 PECY5标记的羊抗兔IgG 现货供应 0.1mlbetaAmyloid(116
Goat Antirabbit IgG/PE PE标记的羊抗兔IgG 现货供应 0.1mlBetaAmyloid(116
Goat Antirabbit IgG/Cy3 Cy3标记的羊抗兔IgG 现货供应 0.1mlBetaAmyloid(128
Goat Antirabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗兔IgG 现货供应 0.1mlBetaAmyloid(140
Goat Antirabbit IgG/PECy3 PECy3标记的羊抗兔IgG 现货供应 0.1mlBetaarrestin 1/2(betaarrestin 1/2
Goat Antirabbit IgG/APC APC标记的羊抗兔IgG 现货供应 0.1mlBetacasein( Betacasein
Dystrophin Associated Glycoprotein 1英文简称CLPTM1L锌指蛋白185 检测范围:1253nmol/L24ng/ml
utrophin英文简称DEFα1锌结合醇脱氢酶结构域蛋白2 检测范围:1254nmol/L
matrilysin英文简称MBL2锌指蛋白909 检测范围:1255nmol/L10ng/ml
Stromelysin2英文简称NUSγ基丁A受体相关膜蛋白3 检测范围:1256nmol/L8ng/mL
Kallikrein 10英文简称RTN4锌指蛋白288 检测范围:1257nmol/L20ng/ml
Kallikrein 11英文简称RTN4B锌指蛋白ZBTB38 检测范围:1258nmol/L
Kallikrein 2英文简称MFSD2A锌指蛋白693 检测范围:1259nmol/L400pg/ml
Kallikrein 6英文简称NDUFB4锌指蛋白ZBTB12 检测范围:1260nmol/L200ng/ml
Kininogen英文简称NDUFB8锌指蛋白924 检测范围:1261nmol/L10ng/ml
Kininogen 1英文简称pPPARγ锌指蛋白297 检测范围:1262nmol/L200IU/ml
colonystimulating factor英文简称pPPARγ AbNFκB激活蛋白205 检测范围:1263nmol/L200pg/ml
Hexokinase II英文简称DEFα2锌指蛋白23 检测范围:1264nmol/L
methylmalonic acid英文简称DEFα3锌指蛋白146 检测范围:1265nmol/L20ng/ml
Thyroid stimulating antibody英文简称APCR乳腺癌相关基因2(锌指蛋白364) 检测范围:1266nmol/L100ng/ml
thyroid hormone receptor interactor 6英文简称GALNT7细胞周期蛋白1结合蛋白 检测范围:1267nmol/L400pg/ml
转基因品系棉花T304-40染料法qPCR试剂盒DIM-7蛋白抗体 英文缩写:Cyp2-j3
核糖核酸酶Dicer抗体 英文缩写:CYP2R1
内皮细胞和平滑肌细胞衍生的神经纤毛蛋白抗体 英文缩写:CYP2S1
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族2抗体 英文缩写:CYP2W1
DNA连接酶1抗体 英文缩写:CYP39A1
DHH蛋白抗体 英文缩写:CYP3A1
D型多巴色素脱羧酶 英文缩写:CYP3A4
DNA聚合酶α抗体 英文缩写:CYP3A4
MREG蛋白抗体 英文缩写:CYP3A4(Cytochrome p450 3A4)
RAS相关抑细胞生长蛋白1抗体 英文缩写:CYP450