详细介绍
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
产品名称 | 转基因品系甜菜T20-7染料法qPCR试剂盒 |
英文名称 | Dye qPCR kit for transgenic beet t20-7 |
货号 | YSP96663 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
产品仅用于科研引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
动物组织醛酮还原酶1E(aldo-keto reductase 1E)活性比色法定量检测试剂盒6次/盒外观包装:淡黄粉状
25KG/纸板桶可拆
组织脂质过氧化物 (HYDROPEROXIDE)活性二甲酚橙(XYLENOL ORANGE)比色法定量检测试剂盒外观包装:黑色粉状
25KG/纸板桶可拆
组织人类巨细胞病毒蛋白酶(HCMV PROTEASE)活性定量检测试剂盒6次/盒外观包装:浅黄粉状
25KG/纸板桶可拆
体液人类巨细胞病毒蛋白酶(HCMV PROTEASE)活性定量检测试剂盒3×1ml外观包装:红色粉状
25KG/纸板桶可拆
基质金属蛋白酶(MMP)酪蛋白酶谱法(casein-zymography)电泳分析试剂盒(MMP2/9)外观包装:浅绿粉状
25KG/纸板桶可拆
基质金属蛋白酶(MMP)胶原蛋白酶谱法(collagen-zymography)电泳分析试剂盒(MMP2/9)6次/盒外观包装:浅绿粉状
25KG/纸板桶可拆
动物细胞氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法检测试剂盒外观包装:淡红粉状
25KG/纸板桶可拆
动物组织氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法检测试剂盒1ml(500X)外观包装:淡黄粉状
25KG/纸板桶可拆
细胞甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法定量检测试剂盒100ml外观包装:红色粉状
25KG/纸板桶可拆
组织甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法比色法定量检测试剂盒500 ml外观包装:淡黄粉状
25KG/纸板桶可拆
血液甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法比色法定量检测试剂盒外观包装:灰色粉状
25KG/纸板桶可拆
真菌/酵母甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法比色法定量检测试剂盒外观包装:淡黄粉状
25KG/纸板桶可拆
植物甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法比色法定量检测试剂盒500 ml外观包装:绿色粉状
1KG/铝箔袋可拆
细菌甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法比色法定量检测试剂盒外观包装:青色粉状
25KG/纸板桶可拆
卵磷脂磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine;PC)比色法定量检测试剂盒定量检测试剂盒外观包装:白色粉状
25KG/纸板桶可拆
细胞中链脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)总活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒3×1ml外观包装:绿色粉状
25KG/纸板桶可拆
转基因品系甜菜T20-7染料法qPCR试剂盒磷酸化原癌蛋白CBL2抗体 英文缩写:Cryptochrome 1
磷酸化周期素依赖激酶2抗体 英文缩写:CRYZL1
磷酸化周期素依赖激酶2抗体 英文缩写:CSAD
细胞分裂周期蛋白25抗体 英文缩写:CSDC2
磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体 英文缩写:CSF3
磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体 英文缩写:CSF3/G-CSF peptide
磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体 英文缩写:CSFV
半胱氨酸蛋白酶8抗体 英文缩写:CSFV
半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗体 英文缩写:CSFV
C型凝集素结构域家族5成员A抗体 英文缩写:CSFV Envelope glycoprotein E2