详细介绍
产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 转基因品系番茄B,DA,F PCR试剂盒 |
英文名称 | B, Da, f PCR kit for transgenic tomato lines |
货号 | YSP96761 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
产品仅用于科研不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
OPCML Others Human 人 OPCML 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-R101大鼠脑动脉血管平滑肌细胞*培养基100mL
HEXB Others Human 人 Hexosaminidase B / HEXB 人细胞裂解液 (阳性对照)
G-7细胞,小鼠骨骼肌肌肉母瘤细胞 人肾癌细胞,GRC-1细胞 人小气道上皮细胞HSAEpiC
小耳猪肾细胞;SEPfk
小鼠小脑星形胶质细胞MA-c
Leptin receptor 瘦素受体规格: 0.1ml
Leptin receptor(long) 瘦素受体(长)规格: 0.2ml
Leptin receptor(long) 瘦素受体(长)规格: 0.2ml
Leptin receptor(L/M/S) 瘦素受体(长、中、短型)规格: 0.2ml
L-enk 亮氨酸脑啡肽规格: 0.2ml
Epimedin A分子式:C39H50O19分子量:822.8
Epmedin B分子式:C38H48O19分子量:808.78
Epmedin C分子式:C39H50O19分子量:822.8
EPO906
EPO906
Epothilone B分子式:C27H41NO6S分子量:507.68
Epothilone B分子式:C27H41NO6S分子量:507.68
EPTC分子式:C9H19NOS分子量:189.32
Eriochrome black T分子式:C20H12N3NAO7S分子量:461.38
Eriochrome black T分子式:C20H12N3NAO7S分子量:461.38
Eriochrome black T分子式:C20H12N3NAO7S分子量:461.38
Eriochrome black T分子式:C20H12N3NAO7S分子量:461.38
Eriochrome black T分子式:C20H12N3NAO7S分子量:461.38
Eriochrome black T分子式:C20H12N3NAO7S分子量:461.38
Eriochrome black T分子式:C20H12N3NAO7S分子量:461.38
Eriochrome blue SE分子式:C16H9CLN2NA2O9S2分子量:518.81
Eriochrome blue SE分子式:C16H9CLN2NA2O9S2分子量:518.81
Eriochrome blue SE分子式:C16H9CLN2NA2O9S2分子量:518.81
Eriochrome Red B分子式:C20H15N4NAO5S分子量:446.41
Eriochrome Red B分子式:C20H15N4NAO5S分子量:446.41
转基因品系番茄B,DA,F PCR试剂盒上皮细胞膜蛋白3抗体 英文缩写:ErbB 3
膜蛋白EVC2抗体 英文缩写:ErbB 4
哺乳动物室管膜相关蛋白1抗体 英文缩写:ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3)
内皮细胞粘附分子抗体 英文缩写:ErbB4
上皮细胞有丝分裂蛋白抗体 英文缩写:ERC1
Emerin蛋白抗体 英文缩写:ERC2
细胞外信号调节激酶5抗体 英文缩写:ERCC1
磷酸酶/磷酸二酯酶家族成员5抗体 英文缩写:ERCC6L
早期生长反应蛋白2抗体 英文缩写:ERCC8
磷酸化雌激素受体β抗体 英文缩写:Erdj5/DNAJC10
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。