详细介绍
产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 转基因品系玉米MON809染料法qPCR试剂盒 |
英文名称 | Dye qPCR kit for transgenic maize mon809 |
货号 | YSP96740 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
产品仅用于科研不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
HINT1 组三聚体核苷结合蛋白1 现货供应 0.2ml Uracil
HIRA/DGGR1 组蛋白替换精蛋白DGGR1 现货供应 0.1ml Uracil
Histone H3 组蛋白H3 现货供应 0.1ml Propantheline bromide
PhosphoHistone H3 (Ser10) 组蛋白H3 现货供应 0.1ml Tulobuterol hydrochloride
PhosphoHistone H3 (Ser28) 组蛋白H3 现货供应 0.1ml N(Isoxazol5yl)sulphanilamide
PhosphoHistone H3 (Thr11) 组蛋白H3 现货供应 0.1ml Labetalol hydrochloride
PhosphoHistone H3 (Thr3) 组蛋白H3 现货供应 0.1ml Salicylamide
Histone H3 (tri methyl K36) *基组蛋白H3 现货供应 0.1ml Feprazone
enterovirus71 antibody英文简称EV71Ab原纤维蛋白1 检测范围:4060nmol/L160ng/ml
soluble Tolllike receptor 2英文简称sTLR2性成纤维细胞生长因子 检测范围:4061nmol/L40ng/mL
Immunoglobulin G2a英文简称IgG2a补体因子H 检测范围:4062nmol/L120μg/mL
Immunoglobulin G1英文简称IgG1纤维细胞生长因子结合蛋白 检测范围:4063nmol/L320μg/mL
Immunoglobulin G2b英文简称IgG2bFas活的丝/苏激酶 检测范围:4064nmol/L160μg/mL
phospho glycogen synthase kinase 3β英文简称PGSK3β脆性组三联体 检测范围:4065nmol/L480pmol/L
Nodlike receptor9英文简称NLR纤维母细胞表面蛋白 检测范围:4066nmol/L1000pg/mL
cyclic citrullinated peptide antibody英文简称CCPAb卵泡抑素 检测范围:4067nmol/L120U/mL
thymosin b4英文简称thymosin b4叉头蛋白J1 检测范围:4068nmol/L1200pg/mL
thymosin b10英文简称thymosin b10脑型脂肪结合蛋白 检测范围:4069nmol/L2000pg/mL
prothymosinα英文简称PTMα成纤维细胞生长因子10 检测范围:4070nmol/L2000ng/mL
rheumatoid factor IgM英文简称RF IgM促卵泡刺激素受体 检测范围:4071nmol/L24mg/L
rheumatoid factor IgG英文简称RF IgG范可尼贫血相关蛋白F 检测范围:4072nmol/L2400ng/mL
rheumatoid factor IgA英文简称RF IgA凝血因子5 检测范围:4073nmol/L480ng/mL
AFB1 albumin英文简称AFB1AFas相关1因子 检测范围:4074nmol/L400pg/ml
转基因品系玉米MON809染料法qPCR试剂盒磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 英文缩写:EEF1G
电子转移黄素蛋白α抗体 英文缩写:EEF2
前列腺素E受体蛋白4抗体 英文缩写:EEF2k
风疹病毒糖蛋白抗体 英文缩写:EF-CBP2
EFR3A蛋白抗体 英文缩写:EFEMP2
ENAH蛋白抗体 英文缩写:EFHA1
乙基丙二酸脑病蛋白抗体 英文缩写:EFHC1
转录因子E2F-3抗体 英文缩写:EFHC2
转录因子E2F-5抗体 英文缩写:EFHD1
DNA切除修复蛋白1抗体 英文缩写:EFR3A
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATG随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。